【摘 要】
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覆盆子(Rubus chingii Hu)是药食同源植物,其未成熟浆果是具有益肾固精和抗衰老等功效的收涩类中药,而其成熟浆果可鲜食,亦可加工为果酱和果酒等。已有研究表明,覆盆子富含多酚类化合物,具有显著的抗氧化、抗炎及抗肿瘤等活性,在食品、药品、保健品和化妆品有着广泛的应用。但目前覆盆子多酚的高效绿色提取方法有限,其口胃肠的稳定性也缺乏了解。因此,本文优化了覆盆子多酚超声辅助低共熔溶剂(Deep
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覆盆子(Rubus chingii Hu)是药食同源植物,其未成熟浆果是具有益肾固精和抗衰老等功效的收涩类中药,而其成熟浆果可鲜食,亦可加工为果酱和果酒等。已有研究表明,覆盆子富含多酚类化合物,具有显著的抗氧化、抗炎及抗肿瘤等活性,在食品、药品、保健品和化妆品有着广泛的应用。但目前覆盆子多酚的高效绿色提取方法有限,其口胃肠的稳定性也缺乏了解。因此,本文优化了覆盆子多酚超声辅助低共熔溶剂(Deep eutectic solvents,DES)提取工艺,系统分析了覆盆子中游离态多酚和结合态多酚的化学和抗氧化活性差异,进而研究覆盆子多酚的胃肠道稳定性与生物可及性,以期为覆盆子的深层开发提供理论线索。本研究主要结论如下:1.超声辅助低共熔溶剂(DES-UAE)提取覆盆子多酚工艺优化。通过单因素试验和响应面设计,优化了超声波辅助DES(氯化胆碱+乳酸),提取覆盆子多酚的条件。在超声功率为420 W时的最佳条件为料液比1:45(g/mL),含水量50%,提取时间50 min。所得总多酚提取含量为95.08 mg GAE/g DW,约为水提取(W-UAE)的2倍;总黄酮提取含量为52.24 mg RE/gDW,高于有机试剂提取量;总单宁提取含量为8.04 mg CE/g DW,均与预测值接近。利用HPLC鉴定覆盆子多酚的化学组成,主要的酚酸类化合物是阿魏酸和没食子酸,黄酮类化合物含量较高的是芦丁,其次为表儿茶素和表没食子儿茶素。2.覆盆子多酚化学组成及其抗氧化活性研究。选择有机溶剂(E-UAE)和酸(A-WBE)、碱(B-WBE)、酶(C-WBE)水解分别提取游离态多酚和结合态多酚,对比分析其各自的多酚、黄酮、单宁含量及体外抗氧化能力,通过HPLC定性定量鉴定覆盆子酚类化合物组成及含量。E-UAE提取的多酚、黄酮和单宁含量均多于水提取(W-UAE),说明E-UAE对覆盆子游离态多酚的提取效率远远高于W-UAE。酸水解得到的结合态多酚含量比碱水解和酶水解的多,几乎是酶水解的4倍。但3种结合多酚提取不同提取方式对黄酮和单宁含量的变化影响不大。这说明酸水解更有利于覆盆子结合态多酚的释放和提取。游离态多酚溶液中,含量较高的酚酸是丁香酸和咖啡酸,黄酮类中含量较高的是芦丁、表儿茶素和对羟基苯甲酸,E-UAE提取的游离态多酚种类和含量均多于W-UAE。碱水解提取的结合态多酚组成和含量多于酸水解和酶水解,其中酚酸类含量较高的是丁香酸,黄酮类化合物中,酸水解和碱水解中含量较高的是芦丁,这与游离态多酚的结果一致,而酶水解中含量较高的是对羟基苯甲酸。3.覆盆子多酚的胃肠道稳定性与生物可及性研究。通过体外模拟消化模型研究了覆盆子粉末、游离态酚类及结合态酚类在口、胃、肠消化过程中释放情况和抗氧化活性变化,通过HPLC分析其组成及含量。酚类化合物含量从高到低依次为粉末>游离态酚类>结合态酚类,游离态多酚的小肠透过率最高。并对其各消化阶段的酚类物质组成和含量进行分析。咖啡酸、丁香酸和对羟基苯甲酸是覆盆子粉末消化过程的主要多酚类物质,其中的丁香酸和对羟基苯甲酸也是游离态多酚和结合态多酚的主要多酚类物质。除了游离态酚类的小肠-SF阶段,其他消化过程都检测到椴树苷,可见椴树苷在体外消化各阶段可稳定释放。覆盆子粉末经消化后表现出较强的抗氧化能力,游离态酚类次之,结合态酚类最弱,抗氧化活性与多酚类物质含量的多少呈正相关。
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