多壁碳纳米管对热带爪蛙的生长和繁殖毒性效应及其机理研究

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碳纳米管(CNTs)是一种新型纳米材料,具有特殊的理化性质,被广泛应用于众多领域中。然而,随着全球对碳纳米科技的投入和碳纳米材料产量的不断增加,CNTs将不可避免的进入到水环境中,其可能产生的水生生态毒性引起广泛关注。目前,已有研究指出CNTs会对大型蚤、斑马鱼等水生动物产生毒性效应,而关于CNTs对两栖动物的毒性效应却鲜有报道。本研究以热带爪蛙胚胎为受试动物,采用半静态暴露的方法,以胚胎的死亡率,孵化率,畸形率,畸形类型和概率、心率和体长等作为毒性测试终点,研究了不同浓度多壁碳纳米管(MWCNTs)悬液对不同发育阶段胚胎的急性毒性效应及其作用机理。结果显示:浓度为25、50 mg/L MWCNTs悬液对热带爪蛙胚胎均有毒性作用,一定程度上提高了胚胎死亡率和畸形率,降低其孵化率,而对心率和体长没有显著性影响(p>0.05)。所有畸形类型中,心腔水肿占的比例最大,达到28.7%,而脊索弯曲次之。不同发育阶段胚胎对MWCNTs的敏感程度不同,由强到弱依次是:原肠胚期、囊胚期、神经胚期、尾芽期。其主要的作用机理可能与MWCNTs粘附在胚胎外层的胶质膜上有间接关系。另外,也探究了不同浓度MWCNTs悬液对热带爪蛙蝌蚪的急性毒性实验及恢复性试验。结果表明,不同浓度MWCNTs悬液(0.5、1、2、4、8 mg/L)均对热带爪蛙蝌蚪产生毒性效应,在一定程度上提高其死亡率,诱导心率不齐,并呈现一定的剂量-效应关系。通过对蝌蚪个体光学显微镜和场发射电子扫描显微镜观察发现,蝌蚪在缺乏食物时,极容易摄入MWCNTs,并富集鳃和消化道等靶器官上,对蝌蚪造成不同程度毒性作用。另外,低浓度实验组(0.5 mg/L)80%的存活蝌蚪经过4 d恢复后,仅有43.3%幸存,而高浓度实验组(8 mg/L)全部死亡,这可能与MWCNTs在蝌蚪体内的富集量超出自身的承受量导致难以排泄掉有直接关联。经计算,MWCNTs对蝌蚪72 h的半数致死浓度LC50为2.53 mg/L。最后,还探究了低浓度MWCNTs悬液对性成熟热带爪蛙的慢性毒性效应及潜在生殖毒性。结果表明,长期暴露于MWCNTs水环境中,会降低热带爪蛙的体重和脂肪、睾丸、卵巢等组织的质量,而对心脏和肺的质量没有影响;可以诱导精原细胞和卵原细胞的数量和活性下降,增加肺空炮的形成,但没有明显增生心脏或肝脏的结缔组织;也可以通过呼吸方式摄入MWCNTs,并富集在肺里。另外,长期暴露于MWCNTs水环境中会降低热带爪蛙胚胎的受精率和存活率,具有一定的生殖毒性。综合上述实验结果,MWCNTs对热带爪蛙不同发育阶段均有一定毒性效应,该研究结果为合理评价MWCNTs对两期动物的毒性效应提供一定的科学依据。
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