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幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，简称H.pylori)感染是人慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因，与胃腺癌和胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的发病也密切相关，全世界多于50％的人受其感染。脲酶是H.pylori产生的最重要酶类之一，可分解尿素生成氨和二氧化碳，使局部pH升高，对H.pylori在人消化道的定植有重要的作用，也与H.pylori的致病性相关。
本文采用固体平板Columbia培养基添加1％环糊精、50μg/ml胆固醇等建立了H.pylori无血清培养体系，为H.pylori的生理代谢和蛋白质组学等研究提供前提条件和理论基础。
同时，实验数据揭示此无血清培养基添加100μmNiCl2显著提高H.pylori脲酶的表达水平，酶活性升高约16倍；收获菌体总蛋白增加1.4倍；首次发现脲酶酶比活升高的同时，脲酶A亚基的纯度提高1.6倍左右，菌体胞内A亚基纯度升高约1.3倍，而胞外为1.7倍；但B亚基纯度均无明显变化。
脲酶是H.pylori疫苗研制中重要保护性抗原和模式蛋白，在H.pylori的临床血清检测也广泛应用。本文采用三次水振荡抽提法，从幽门螺杆菌固体培养基中抽提得到脲酶粗酶；先后采用QSepharose阴离子交换层析，PhenylSepharose疏水相互作用以及SOURCE30SSepharose阳离子交换层析等纯化得到了脲酶。SDS-PAGE显示纯化得到高纯度的脲酶(纯度＞95％)，由分子量为66kDa的A亚基和30kDa的B亚基组成。酚红脲酶试剂测定其酶比活为19.7mMurea/mg/min，总蛋白回收率为2.58％。此层析纯化方法为一种快速、高回收率的脲酶纯化方法，纯化得到的脲酶可为H.pylori疫苗研制和血清检测研究等提供物质基础和必要条件。