【摘 要】
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目的:构建葡激酶(Staphylokinase, SAK)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌原核表达系统中表达SAK蛋白,检测其蛋白质的表达情况,纯化该蛋白质并初步鉴定其生物学活性,为临床血栓性疾病的治疗提供可能的溶栓新药。方法:基于生物信息学方法,分析优化基因序列,使用基因合成技术合成葡激酶的基因序列,连接表达载体,转化感受态大肠杆菌克隆菌株DH-5α,运用PCR的方法筛选阳性克隆,提取双酶切阳性的
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目的:构建葡激酶(Staphylokinase, SAK)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌原核表达系统中表达SAK蛋白,检测其蛋白质的表达情况,纯化该蛋白质并初步鉴定其生物学活性,为临床血栓性疾病的治疗提供可能的溶栓新药。方法:基于生物信息学方法,分析优化基因序列,使用基因合成技术合成葡激酶的基因序列,连接表达载体,转化感受态大肠杆菌克隆菌株DH-5α,运用PCR的方法筛选阳性克隆,提取双酶切阳性的质粒,并转化感受态大肠杆菌BL21菌株,使含有葡激酶目的基因的质粒在BL21大量表达目的蛋白-葡
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羟基喜树碱(HCPT)是我国临床上批准应用的有效的喜树碱(CPT)类抗癌药物,广泛应用于各种恶性肿瘤的临床治疗。但是由于HCPT具有毒副作用大、在水中溶解度低、体内半衰期短、结构不稳定等特性,限制了其在临床上的应用。通过制备新型的缓释制剂,可以明显地改善药物的上述缺陷,达到靶向和缓释的效果,因此本文研究了三种不同HCPT缓释制剂的制备方法,以期提高其抗肿瘤活性。利用静电吸附层层自组装技术,以聚赖氨
基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)是一组锌离子依赖蛋白酶,通常由纤维母细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及肿瘤细胞产生,可以清除胶原分子等生物大分子,还可以降解胶原蛋白以及蛋白多糖,同时为新细胞的生长提供适当的空间。MMPs具有广泛的底物特异性,但不是绝对的,同一种MMPs可以降解多种细胞外基质(extracellullamatrixECM)成分,MMPs是细胞外基
近年来,肿瘤的发病率和死亡率不断攀升,严重危害了人类的生命健康,而传统的肿瘤治疗方法和药物存在很多问题,所以研究和开发新型靶向性抗肿瘤药物,具有重要的社会意义和广泛的应用前景。本课题利用EGF与EGFR结合的靶向性及腺病毒E4orf4蛋白选择性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性而设计并构建的融合蛋白EGF-E4orf4的酵母表达载体,并在毕赤酵母中分泌性的表达了EGF-E4orf4融合蛋白。前期工作对融合蛋白
甲状旁腺激素(PTH)是一种可以刺激正常骨组织更新、代谢的激素,它可以增加骨密度,改善骨结构,是临床上治疗骨质疏松症的一种有效药物。本文以PTH的活性中心PTH(1-34)为研究对象。根据PTH(1-34)的cDNA序列,与硫氧还蛋白标签连接,将构建好的PET32a载体转入大肠杆菌中,通过大肠杆菌发酵表达,蛋白的分离纯化获得的基因工程药物。以现有药品申报材料中的纯化工艺为原型,将发酵获得的融合蛋白
5-Fu是一种抗代谢药物,主要用于治疗各种恶性肿瘤。5-Fu口服吸收不规则,需静脉给药,因在肝中快速代谢,导致其血浆半衰期短。此外,5-Fu对机体正常组织及病理部位无选择性,对骨髓及消化道毒性较大,其临床应用受到限制。为了降低药物毒副作用及解决药物递送问题,本文设计了一种以FA为配体的5-Fu大分子前药(FA-DEX-5-Fu),并进行了初步细胞学研究。目的合成FA-DEX-5-Fu靶向药物,并进
目的:制备一种以VCAM-1(内皮细胞粘附分子)为识别位点的具有载药能力的靶向超声造影微泡,并对其载药能力,控制释放能力,体外寻靶能力以及其相关应用进行评价。方法:首先,以机械振荡法制备载紫杉醇微泡,通过紫外分光光度法评价其载药量,并借助亲和素-生物素体系构建具有靶向功能的药物载体,超声显影仪对其显影效果进行评价,随后,体外模拟剪切力作用来评价靶向微泡识别内皮细胞的能力,最后,借助超声定位辐照技术
血管内皮细胞连续的覆盖在在全身血管内膜上,研究发现内皮细胞的生理功能除了是血液和组织的屏障,还具有其他多种功能,如降低血管通透性,调节血液与组织的物质交换,减少无序侵入的血浆成分和血液细胞的数量;通过合成和分泌相关因子调节血管平滑肌功能;抑制白细胞的游走和侵入。鉴于这些生理功能,血管内皮细胞的损伤是诸如动脉粥样硬化、高血压、糖尿病等一系列疾病的始动环节。因此,研究血管内皮细胞损伤的机制为心血管疾病
非典型抗精神病药(atypical antipsychotics,AAP)发展于20世纪80年代左右,近10年来,作为治疗精神分裂症的第二代药物在临床上的使用越来越广泛。非典型抗精神病药在改善阳性、阴性症状和认知障碍方面有较好的疗效,特别是改善阴性症状方面,是在传统抗精神病药物作用上的突破,其作用机制主要与阻滞中枢5-HT受体和D_2受体有关,并且是一类较少产生锥外体系反应(EPS)的药物。第二代
目的:研究布地奈德(Budesonide,BUD)对人气道上皮9HTEO-细胞增殖的影响及其相关miRNA抑制9HTEO-细胞增殖的分子机制。方法:CCK-8法检测布地奈德对9HTEO-细胞增殖的影响;流式细胞术检测BUD对9HTEo-细胞周期分布的影响;瑞氏染色法观察BUD处理9HTEo-细胞后形态变化;Hoechst33258染色观察BUD处理9HTEo-细胞核的变化;透射电镜观察BUD处理9
实验一艾塞那肽对H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用目的:观察胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)类似物艾塞那肽(Exenatide,EX)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化应激损伤。激光共聚焦检测正常H9c2细胞GLP-1受体(GLP-1R)表达;MTT法检测细胞活力,酶