胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)是消化道中最常见的间叶组织来源实体瘤。大约85%的GIST存在酪氨酸激酶受体(receptor tyrosine kinase,RTK)KIT癌基因突变,5%-10%的GIST存在另一个RTK PDGFRA癌基因突变。目前研究表明组成型激活的突变体KIT与PDGFRA癌蛋白是治疗GIST的分子靶标。临床上使用的一线治疗药物是伊马替尼(Imatinib,IM),它是一种小分子抑制剂,能够特异性地抑制KIT和PRKCQ激活。尽管IM用药初期大部分GIST病人有很好的临床反应,但是随着用药时间延长,2-3年后患者会逐渐对IM产生耐药性。研究表明IM耐药机制中,有5%-10%的GIST耐药性患者会出现癌蛋白KIT表达丢失的情况,然而目前尚未发现有取代KIT的致癌新机制。因此本课题就该情况进行了深入的研究。我们前期通过转录组测序发现在KIT表达丢失的耐药性GIST中,CCND1的表达显著升高,同时伴随着PRKCQ的表达下调和JUN的表达上升,且Hippo/YAP信号通路被激活。并且抑制cyclin D1的表达对细胞生长具有明显的抗增殖和促凋亡效应。因此本文假设cyclin D1是KIT表达丢失的耐药性GIST中的重要中介者,PRKCQ、JUN以及Hippo/YAP信号通路协同调控GIST的增殖。本文主要通过western、荧光原位杂交、细胞生长、细胞凋亡、细胞周期、双荧光素酶活力分析、qRT-PCR、Co-IP等实验,阐明了 KIT非依赖性的耐药GIST独特的生物学机制,为IM耐药性的GIST提供新的治疗靶点。结果表明:与KIT突变的异常高表达型GIST相比,在KIT表达丢失的耐药性GIST中,cyclin D1表达上升,抑制cyclin D1具有显著的抗增殖和促凋亡效应。PRKCQ,JUN和Hippo/YAP信号通路协同调节cyclin D1的表达;PRKCQ,而不是KIT,负调控cyclin D1,JUN和Hippo信号通路效应蛋白YAP/TAZ是cyclin D1的正调节因子。这些发现为GIST患者的临床管理与治疗提供了新的理论依据与治疗策略:Cyclin D1可以成为治疗KIT表达丢失的耐药性GIST的新靶标,同时联合PRKCQ,JUN和Hippo/YAP途径可能是治疗这类GIST亚型的新策略。