CtIP蛋白在肝癌组织中的表达及其意义

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目的探讨DNA双链断裂修复途径中关键蛋白CtIP在人肝癌组织中的表达情况,同时结合临床特征分析其在肝癌发生发展中的意义。方法1.应用免疫组化亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)三步法技术检测60例肝癌组织及其对应的癌旁组织中CtIP蛋白的表达水平。2.应用Western-blot蛋白印迹实验技术检测上述2种组织的CtIP蛋白的表达水平。3.应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测上述60例肝癌患者的肝癌组织和相应癌旁组织中CtIP mRNA的表达水平。4.分析CtIP蛋白表达水平与肝癌临床特征之间的关系。结果1.免疫组化实验显示CtIP蛋白阳性染色定位于细胞胞核和胞质,主要位于细胞胞核中,肝癌细胞中染色呈棕黄色粗大的团块状或颗粒状,癌旁组织阳性染色明显弱于肝癌组织,呈淡棕色。间质细胞未见明显阳性染色。60例肝癌组织中有38例CtIP蛋白表达阳性,阳性率为63.3%;对应的癌旁组织中有15例表达阳性,阳性率为25.0%,两者间具有显著性差异(p<0.05)。2. Western-blot实验发现120KDa处有一特异性条带,肝癌组织中CtIP蛋白表达条带的深度明显高于癌旁组织,测定灰度值并定量分析结果显示,肝癌组织CtIP蛋白相对表达量高于癌旁组织,两者间差异有统计学意义(p<0.05),与免疫组织结果一致。3.60例肝癌及对应癌旁组织标本中,肝癌组织CtIP蛋白mRNA相对表达量明显高于癌旁组织,两者差异有统计学意义(p<0.05)。4.分析CtIP蛋白的表达与肝癌的临床特征的关系发现:CtIP蛋白表达水平与患者有无包膜和肝内、淋巴结或远处转移有关(p﹤0.05),而与性别、肿瘤直径大小和Edmondson分级无关(p﹥0.05)结论CtIP蛋白及其mRNA在肝癌组织中的表达水平显著高于相应癌旁组织,这种表达异常可能与人类肝癌的发生和转移有关,对临床诊断和治疗有一定的参考意义。
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