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骨髓造血干细胞经过逐步分化成为巨核系定向祖细胞，然后再分化为成熟的巨核细胞，最后裂解产生血小板，血小板是参与凝血作用的关键成分。目前，一致认为血小板生成素(Thrombopoietin，TPO)是调节巨核细胞生成和增殖的最重要的细胞因子。干细胞因子(Stem Cell Factor，SCF，也称Kit配体等)是一种多功能细胞因子，能在多级造血水平与其他细胞因子协同作用促进造血干/祖细胞及各系血细胞的存活和增殖。目前已进入临床试验的TPO重组蛋白虽然能有效地提高体内血小板的水平，但作为巨核细胞来源的造血干/祖细胞增殖速度太慢而巨核细胞的成熟分化过快，造成血小板稳定的时间不长，并有引发血栓的倾向，限制了其使用范围。因此促进造血干/祖细胞增殖将有利于巨核细胞的产生和血小板的稳定升高。本论文构建了一种新型的TPO与SCF融合蛋白，探索其促血小板生成活性，为寻求稳定有效的升血小板药物探索新途径。
我们应用DNA重组技术构建了含有人TPO的1-157位氨基酸、16个氨基酸的连接肽(GGGGSPGGSGGGGSGG)和人SCF的1-145位氨基酸编码序列的TPO/SCF融合基因片段。并尝试了用昆虫杆状病毒表达系统进行TPO/SCF融合蛋白的表达和纯化。将融合基因克隆到昆虫杆状病毒转移载体pAcSecG2T，并与AcNPV DNA共转染Sf9细胞，经胞内同源重组筛选获得重组病毒AcNPV-rhTPO/SCF。重组病毒感染Sf9细胞后表达的rhTPO/SCF经两次GlutathioneSephrose4B亲和柱层析和凝血酶切割，获得了纯度约90％的电泳纯重组蛋白。
TF-1细胞增殖实验显示的rhTPO/SCF的比活为7.10±0.95×106 units/μmol，是E.coli来源的单体rhSCF参照品比活的1.2倍左右。Mo7e细胞增殖实验显示rhTPO/SCF的比活为2.90±0.35×107units/μmol，约是单体rhTPO比活的1.7倍。