【摘 要】
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泛素化调节是一个可逆的过程,它存在一个对立的去泛素化机制,是在去泛素化酶的作用下将泛素标记从底物蛋白上移除的过程。去泛素化酶是超级大家族,对生物体代谢平衡有重要作
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泛素化调节是一个可逆的过程,它存在一个对立的去泛素化机制,是在去泛素化酶的作用下将泛素标记从底物蛋白上移除的过程。去泛素化酶是超级大家族,对生物体代谢平衡有重要作用,参与调控肿瘤的形成和增长、细胞的分化、染色质的转录,并对神经退行性疾病产生重要影响。酵母中去泛素化酶Ubp8具有参与调控细胞进程的重要功能,不仅能够通过SAGA复合物调控组蛋白的去泛素化来影响染色质结构,还可以去泛素化非组蛋白Snf1激酶。真菌中Snf1途径高度保守并与碳代谢阻遏相关,稻瘟病菌中Snf1参与调控致病性。为了研究稻瘟病菌中该基因的功能,我们在稻瘟病菌数据库中查找Ubp8的同源基因,得到MGG<sub>03527,该基因编码蛋白含有保守的锌指结构和UCH结构域,故将其命名为Moubp1。通过基因敲除的方法对Moubp1基因进行了功能分析。结果发现,Moubp1突变体菌株的分生孢子梗数量显著减少、产孢量显著下降,并对分生孢子的形态建成和萌发产生影响。同时,该基因的缺失使得稻瘟病菌对水稻及大麦的致病性显著下降,对洋葱和大麦表皮的穿透和扩增能力也明显降低。荧光定量分析发现,突变体菌株的黑色素合成相关基因的表达量降低。此外,基因的缺失对病菌细胞壁的敏感性和逆境胁迫产生一定的影响。荧光显微观察表明,基因Moubp1定位于细胞质中。另外,与野生型菌株相比,突变体菌株在木糖为唯一碳源培养基上的菌落生长减缓,而对2-脱氧葡萄糖的敏感性下降。综上所述,基因Moubp1在稻瘟病菌的生长发育和致病性中发挥着重要作用,同时还可能参与了碳代谢阻遏调控。
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