昆明地区芒果果实变应原致敏性的调查分析及实验研究

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianjinajun
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目的:调查来我院就诊的变态反应性疾病患者主要的食物过敏原及芒果果实变应原阳性反应率;分析对芒果果实变应原呈阳性反应者的几种相关因素;研究自制成熟芒果果肉变应原浸液蛋白质组份及免疫血清效价,为本地区变应原的制作开发及标准化奠定基础。方法:①对1901例变态反应性疾病患者进行皮内试验检测食物变应原,同时参考传统的水果变应原浸液制备方法,用变应原提取液常压过滤、提取液离心上清液及提取液离心上清液加常压过滤三种方法制备昆明地区市售品种芒果果实变应原浸液;②进行自制芒果果实变应原浸液小鼠急性毒性试验;③采用不连续SDS-PAGE电泳及考马斯亮兰染色定性检测芒果果实变应原浸液的蛋白质组份;④以HRP-SPA为二抗,用间接Dot-ELISA测定芒果果实变应原浸液的豚鼠抗血清IgG抗体。结果:①1901例变态反应性疾病患者食物变应原检测结果显示过敏阳性率:淡水鱼(65.4%)、海鱼(62.5%)、虾(55.5%)、鸭肉(48.5%)、羊肉(47.3%);芒果阳性率为42.3%,居第七。芒果果实变应原阳性反应率与受检者年龄及就诊检测时间有显著性差异(P<0.001);男女阳性率之比1:1.61,两者具有统计学意义(P<0.05);受检患者主要以荨麻疹、接触性皮炎就诊,其阳性反应率与临床诊断有统计学意义(P=0.007);但与发病部位无明显差异(P>0.05);②三种不同方法提取和制备芒果果实变应原浸液中以离心上清液加常压过滤法蛋白浓度最高,此法自制芒果果实变应原浸液行小鼠急性毒性试验观查14天,未见一例死亡;③不连续SDS-PAGE电泳见芒果果实变应原浸液显带9条,分子量在30~99 kDa之间;④Dot-ELISA检测结果显示芒果果实变应原浸液能与相应豚鼠抗血清发生反应,抗体滴度1:64。结论:昆明地区变态反应性疾病中,芒果可能是一种重要的食物致敏因素,其皮内试验阳性率为42.3%,芒果果实变应原皮内试验阳性率与受检者年龄、性别、检测时间、临床表现有关;首次探索出以离心上清液加常压过滤法制作的芒果果实变应原浸液蛋白浓度最高,经动物急性毒性试验证实此法自制的芒果果实变应原浸液符合无毒性规定;初步分离了芒果果实变应原致敏蛋白质组份;首次证实芒果果实变应原浸液与豚鼠抗血清有特异IgG应答,且效价较高。
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