二烯丙基二硫诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡的分子机制

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目的:采用基因芯片方法分析二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡相关基因,初步探讨DADS诱导CNE2细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT法检测DADS抑制CNE2细胞增殖的IC50值;细胞生长曲线分析DADS对CNE2细胞生长的抑制作用;Hochest染色法、流式细胞术及DNA凝胶电泳法,检测DADS诱导CNE2细胞凋亡的情况;采用基因芯片,检测DADS诱导CNE2细胞凋亡相关基因;RT-PCR和Wester blot验证基因和蛋白的表达情况。结果:1、DADS抑制CNE2细胞增殖的ICso值为30 mg·L-1;随着DADS浓度增加,处理时间延长,CNE2细胞抑制明显增加(P<0.05)。2、Hochest染色结果显示,用30mg·L-1 DADS可诱导CNE2细胞中出现典型的凋亡形态学改变。3、流式细胞术结果显示,随着]DADS浓度的升高,CNE2细胞的凋亡率逐渐增加(P<0.05)。4、琼脂糖凝胶电泳结果显示,随着DADS浓度升高达到30mg·L-1时,可见DNA梯形条带。5、基因芯片共检测出1074个差异表达基因,其中与细胞凋亡相关基因24个(上调基因19个,下调基因5个)。6、RT-PCR和Wester-blot结果证实上调基因SON和下调基因IL24与基因芯片检测结果基本一致。结论:1、DADS可诱导CNE2细胞凋亡2、DADS诱导CNE2细胞凋亡可能与TRAF1、CASP9、FOXO1A和IL24等基因的表达上调和PIK3R3、ELMO1、SON和DFFB等基因表达下调有关。
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