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目的:随着医疗水平的提高和人们保健意识的增强,输卵管妊娠的早期诊断率明显提高,约有80%的输卵管妊娠可以在破裂前得到诊断,从而使得保守治疗成为输卵管妊娠的首选方法。尽管保守治疗的方法很多,但其成功率始终波动在70~95%,仍有一部分病例在保守治疗过程中发生输卵管妊娠破裂,中途转为手术治疗。怎样预测输卵管妊娠的预后,并使病人得到最经济有效的治疗,是临床工作者面临的一个现实问题。本研究通过免疫组化技术从蛋白水平检测在输卵管妊娠患者局部组织中的细胞增殖抗原Ki-67在滋养细胞中的表达,结合术前血清β-hCG值的检测,来探讨血β-hCG值与滋养细胞增殖活性、滋养细胞对输卵管管壁浸润深度的关系,并分析Ki-67的阳性表达与血β-hCG值的相关性,期望为输卵管妊娠自发破裂的预测提供线索。
方法:2007年1月至2008年10月间在沧州中西医结合医院行手术治疗的输卵管妊娠患者38例,取术中切除的输卵管标本,进行光镜观察。根据滋养细胞浸润深度分成三组(期):Ⅰ组(期)为滋养细胞浸润输卵管粘膜层,Ⅱ组(期)为滋养细胞浸润至肌层,Ⅲ组(期)为滋养细胞浸润至浆膜层(穿透肌层)。采用免疫组织化学SP法检测各组标本中Ki-67的表达,OLYMPUS图像分析采集系统拍照分析。以PBS代替一抗的方法设置阴性对照,并以已知阳性的乳腺浸润性导管癌切片作为阳性对照。于术前2小时内抽取病人静脉血采用放射免疫法检测血β-hCG值水平,将血β-hCG水平与局部病变组织中Ki-67的表达强度、滋养细胞浸润的深度进行了相关性分析。
结果:
1.在滋养细胞浸润输卵管粘膜层组(Ⅰ组)中,Ki-67表达的阳性表达率为21.43%,染色阳性细胞数较少,着色较浅。在滋养细胞浸润至输卵管肌层组(Ⅱ组)中,Ki-67的阳性表达率为53.33%,明显高于粘膜组,P<0.05。Ki-67着色的阳性细胞数较多,着色也较深。在滋养细胞浸润至输卵管浆膜层组(Ⅲ组)中,滋养细胞增殖抗原Ki-67的阳性表达率为88.89%,明显高于滋养细胞浸润输卵管粘膜组和肌层组,Ki-67阳性细胞数明显多于Ⅰ组和Ⅱ组,着色也深。各组间Ki-67的阳性表达率存在显著性差异,组间比较,P值均小于0.05。
2.Ⅰ组患者的血β-hCG水平为1416.64±8.59.94 IU/L;Ⅱ组血β-hCG水平为3380.33±2392.36 IU/L;Ⅲ组血β-hCG水平为6999.33±4949.90 IU/L。三组间存在显著性差异,P<0.05。以患者血清β-hCG值3000 IU/L为分界点,当血β-hCG水平≥3000 IU/L时,滋养细胞Ki-67的阳性表达率(92.86%),远高于血清β-hCG值低于3000 IU/L组(25.00%),X2=6.32,P<0.05,差异具有显著性。
3.输卵管妊娠患者局部病变组织中滋养细胞浸润深度与细胞增殖抗原Ki-67表达的阳性表达率和血清β-hCG水平呈正相关(r=0.678,P<0.05)。Ki-67阳性表达率越高,滋养细胞浸润输卵管管壁越深,其血清β-hCG水平亦越高。
结论:
1.输卵管妊娠患者局部病灶组织中Ki-67表达的阳性率与滋养细胞的浸润深度有关,说明较强的细胞增殖活性使得输卵管妊娠滋养细胞更易浸润和破坏管壁并造成输卵管的破裂。
2.以血清β-hCG3000IU/L作为分界值,高水平β-hCG组局部病灶组织中Ki-67表达的阳性率明显高于低水平β-hCG组。说明滋养细胞增殖活性较强时可分泌较高水平的β-hCG。
3.输卵管妊娠患者局部病变组织中Ki-67的阳性表达率和血清β-hCG水平呈正相关。血清β-hCG水平亦越高,提示滋养细胞Ki-67阳性表达率越高,滋养细胞浸润输卵管壁亦越深。