论文部分内容阅读
目的：研究多形拟杆菌干预糖尿病模型小鼠后肠道定植情况，以及与胰高血糖素样肽1（GLP–1）相关性，探索多形拟杆菌定植后对糖尿病影响的可能机制。方法：用BHI血琼脂培养基培养ATCC29148标准菌株，用平板计数法和比浊法测定多形拟杆菌的数量。用6周龄的昆明小白鼠，空白组（n=6），高剂量组1012Cfu/ml（n=6），中剂量给菌组109Cfu/ml（n=6），和低剂量给菌组106Cfu/ml（n=6），高剂量三天1012Cfu/ml（n=6），中剂量三天109Cfu/ml（n=6），和低剂量三天106Cfu/ml（n=6），以实时荧光定量PCR的方法测定肠道内多形拟杆菌的数量，确定多形拟杆菌的定植规律。根据多形拟杆菌的定植情况，干预6周龄的昆明小白鼠空白组（n=10），空白给菌组（n=10），腹腔注射四氧嘧啶造糖尿病模型昆明小白鼠模型组（n=10）和模型给菌组（n=10），观察15天中四组小鼠的体重、空腹血糖水平；实时荧光定量PCR的方法测定肠道多形拟杆菌的数量；运用酶联免疫法（ELISA）测定门脉血和结肠组织匀浆液中GLP-1的水平来反映GLP-1的分泌，血清中C肽的水平来反映与糖尿病的关系。结果：1.多形拟杆菌ATCC29148在BHI血琼脂培养基上生长情况良好，有单一菌落，无污染。高浓度1012Cfu/ml灌胃多形拟杆菌定植数量最多，与其他6组比较有统计学差异（P<0.05）。2.在15天的观察过程中各组体重均增加，但是空白与空白给菌组相比，模型与模型给菌组相比，体重增加更加明显（P<0.05）。空腹血糖空白组与模型组波动不大（P>0.05），空白给菌组与空白组相比FBG升高（P<0.05），并且出现血糖与粪样中多形拟杆菌呈正相关的变化。3.模型组与空白组相比，模型给菌组与模型组相比，空白给菌与空白组相比，小鼠门脉血、结肠组织匀浆液中GLP－1水平降低(P<0.05)。4.在四组小鼠中,以BT(Copy number/g)为纵坐标、一般指标为横坐标，A：体重与BT呈负性相关（r=-0.70, P<0.05）；B： FBG与BT成正相关性（r=0.71, P<0.05）；C：C肽与BT呈负性相关（r=-0.62, P<0.05），D：HOMA-IR与BT呈正性相关（r＝0.55, P<0.05）；E：HOMA-IS与BT呈负性相关（r＝-0.43, P<0.05）。5.在四组小鼠中，以BT (Copy number/g)为纵坐标、GLP-1水平为横坐标。A：门脉血中GLP-1与BT成负相关性（r=－0.73, P<0.05）；B：结肠中GLP-1水平与BT成负相关性（r=－0.52, P<0.05）。结论：1.外源性灌胃给予多形拟杆菌可以在肠道内定植。2.肠道GLP-1的分泌与多形拟杆菌是相关的，可以提示肠道菌群的变化与糖尿病有关。