【摘 要】
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目的:探讨NGR-PEG-QDs跨血脑屏障模型靶向胶质瘤及血管荧光标记可行性及方法。方法:1.体外血脑、血瘤屏障模型的建立:(1)分离培养大鼠原代脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞,采
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目的:探讨NGR-PEG-QDs跨血脑屏障模型靶向胶质瘤及血管荧光标记可行性及方法。方法:1.体外血脑、血瘤屏障模型的建立:(1)分离培养大鼠原代脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞,采用Ⅷ因子和胶质纤维酸性蛋白荧光染色分别对脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞进行鉴定;细胞流式技术检测两种细胞纯度;(2)建立血脑、血瘤屏障体外模型,测量各模型屏障中的跨内皮阻抗,以及对荧光素钠的渗透系数。2.NGR-PEG-QDs的物理学特征测定:(1)Zetasizer Nano ZS型纳米粒度分析仪测定NGR-PEG-QDs粒径、荧光分光光度计测定NGR-PEG-QD不同PH的荧光强度;(2)CCK-8法检测NGR-PEG-QDs对细胞增殖的影响。3.NGR-PEG-QDs靶向胶质瘤和肿瘤新生血管标记:(1)NGR-PEG-QD穿过体外血脑、血瘤屏障模的渗透率测定;(2)激光共聚焦观察NGR-PEG-QDs标记胶质瘤和肿瘤新生血管中绿色荧光。结果:1.原代大鼠脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞细胞纯度达到90%以上。血脑、血瘤屏障体外模型达到有效水平。2.NGR-PEG-QDs纳米粒径小于100nm,在不同PH条件下24h内荧光强度稳定,NGR-PEG-QDs对细胞增殖无明显影响。3.NGR-PEG-QDs可以穿过BBB、BTB体外模型,激光共聚焦观察到BTB体外模型中大鼠原代脑微血管内皮细胞、C6神经胶质瘤细胞可见绿色荧光。结论:NGR-PEG-QDs可以通过结合CD13靶向胶质瘤及肿瘤新生血管。
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