复方丹参注射液对损伤血管内皮细胞的保护作用

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目的:探讨复方丹参注射液(compoundinjectionofDan-shen)对氧化所致损伤的血管内皮细胞(endothelialcell,EC)的保护作用及其对EC分泌的一氧化氮(nitricoxide,NO)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)等物质的影响,从而进一步深入探讨其抗动脉粥样硬化的机制。 方法:本实验采用新生儿脐静脉血管EC体外原代培养方法将血管EC分为3组:①过氧化氢组:用75μmol/L的过氧化氢刺激4小时;②正常组:正常血管内皮;③月参组:在用过氧化氢损伤前于培养液中加入5个不同浓度的复方丹参注射液。用倒置相差显微镜和扫描电镜观察各组EC的形态学特点,并用免疫细胞化学染色法检测细胞间粘附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1),bFGF及转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)在各组间的表达。另外,MTT比色法和细胞上清液中丙二醛(MDA)及NO的含量测定也作为评价复方丹参注射液对受损伤EC的保护作用的衡量指标。 结果:扫描电镜观察显示过氧化氢组EC皱缩变小,细胞表面干裂,胞膜表面有孔隙,表面微绒毛减少甚至消失,微绒毛僵直断裂,分布不规则,细胞间隙增宽。而经月参预处理过的过氧化氢组细胞形态结构则明显改善,其形态、大小与正常组相似。免疫细胞化学检测结果则表明ICAM-1和bFGF在过氧化氢组的表达非常显著,而TGF-β1的表达明显降低;相反,正常组和丹参组相似,ICAM-1和bFGF的表达减弱,而TGF-β1的表达明显增高。另外,MTT比色法显示过氧化氢组的细胞存活率明显降低,而正常组和丹参组的细胞存活率则明显增高,在丹参用药浓度为12.5mg/ml时细胞存活率最高。细胞培养上清液中MDA和NO含量测定也表明过氧化氢组和正常组及丹参组相比差异显著。即过氧化氢组的MDA含量增高(4.81±0.38nmol/ml),而NO含量降低(51.99±15.93μmol/L);相反,正常组和丹参组中MDA含量减少(1.60±0.50nmol/ml和1.62±0.28nmol/ml),而NO含量增高(130.97±20,89μmol/L和259.37±10.44μmol/L)。其效应具有浓度依赖性,在丹参用量为12.5mg/ml时效果最显著。 结论:复方丹参注射液通过其抗氧化作用,对氧化所引起的受损血管EC有保护作用。而且,通过防止EC的氧化及影响NO和某些细胞因子的分泌机制对动脉粥样硬化起到一定的防治作用。
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