NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞Snail、MMP-2表达的影响

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenchaozhi
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背景与目的:卵巢恶性肿瘤在妇科恶性肿瘤中发病率居第三位,死亡率居第一位,其中60%~90%是卵巢上皮性癌(ovarian epithelial carcinoma,简称卵巢癌)。卵巢癌发展快,容易发生淋巴通道及血行通道的转移,预后差。目前,卵巢癌的死亡率在妇科恶性肿瘤中居于榜首,由于发病其隐匿,一般在确诊的时候,大部分已经属于是晚期了,即使给予手术、放疗及化疗后,一部分病人虽然已经达临床缓解,但仍然有70%左右的患者最终还要复发。曾有研究表明:侵袭与转移不仅是恶性肿瘤的重要生物学特征,也是造成肿瘤患者死亡的主要原因。在肿瘤细胞发生侵袭和转移的过程中,参与细胞间相互作用的细胞黏附分子是肿瘤细胞恶性行为的基础,也是许多致癌因素综合作用的最终靶位点。相关研究提示COX-2在妇科恶性肿瘤的细胞凋亡、新生血管形成、肿瘤浸润方面存在某些致瘤机制。用非甾体类抗炎药(NSAID)阻断COX-2的作用在恶性肿瘤的综合治疗研究领域中有着非常重要的地位,选择性COX-2抑制剂在恶性肿瘤的综合治疗中已经成为研究热点。本研究采用选择性COX-2抑制剂(NS-398)作用于体外培养的人卵巢腺癌、高转移的细胞株SW626,观察其对人卵巢癌细胞株侵袭、转移方面的影响,初步探讨选择性COX-2抑制剂对人卵巢腺癌高转移的细胞株SW626的Snail以及MMP-2mRNA及蛋白水平表达的影响,以探索肿瘤细胞侵袭转移的恶性行为的可能的分子生物学机制。方法:本实验选择人卵巢腺癌高转移细胞株SW626体外常规培养;以不同浓度的COX-2抑制剂(NS-398) 0、50、100、200umol/L四个浓度组,每个浓度组选取24h、48h、72h三个作用时间点,MTT法检测其生长情况,计算抑瘤率;以不同浓度COX-2抑制剂(NS-398) 0、50、100、200umol/L四个浓度组,每个浓度组选取24h、48h、72h三个作用时间点采用RT-PCR半定量对不同时间点、不同浓度进行检测SW626细胞Snail、MMP-2基因mRNA水平表达的影响。以不同浓度COX-2抑制剂(NS-398) 50、100、200umol/L,于72h作用的时间点行免疫细胞化学(SABC)观察蛋白水平的表达情况。结果:MTT法测定结果显示:NS-398对人卵巢腺癌细胞株SW626的生长抑制具有时间和浓度的依赖性,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR半定量结果显示:NS-398作用对人卵巢癌细胞株SW626细胞的Snail mRNA的表达情况,随着NS-398药物作用时间的延长及浓度的增加Snail mRNA表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。NS-398能显著抑制人卵巢癌细胞株SW626细胞MMP-2因子的mRNA的表达情况,随着NS-398药物作用时间的延长及浓度的增加MMP-2mRNA表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学结果显示;随着NS-398药物作用浓度的增加,Snail以及MMP-2在蛋白水平的表达均减弱,表达呈浓度依赖性,镜下观察见有显著差异。结论:选择性COX-2抑制剂NS-398能够抑制人卵巢癌细胞株SW626的Snail蛋白和MMP(?)表达,使Snail蛋白及MMP-2的]mRNA及蛋白水平表达下调,这可能是其抑制人(?)巢癌细胞株SW626肿瘤细胞侵袭力的可能机制之一。
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