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该实验设计用含EcoRI和BamHI的PCR引物从E7的真核表达质粒pcDNA (ysE7)中扩增E7基因,低熔点琼脂糖回收法回收310bp的目的片段,将其用EcoRI和BamHI双酶切处理后用相同双酶切的真核表达载体pEGFP-C1(pEGFP-C1中含有增强绿色荧光蛋白基因,EGFP)连接.为了进一步探讨重组的pEGFP-E7质粒转染肿瘤细胞后能否表达以及转染的肿瘤细胞其成瘤性和成瘤后HPV16E7基因的表达情况,该实验采用脂质体法将pEGFP-E7体外转染小鼠肝腹水瘤细胞H22,荧光显微镜下观察绿色荧光-E7融合蛋白的表达;RT-PCR检测特异性HPVI6E7mRNA的生成.