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背景和目的:细胞凋亡在喉癌的发生、发展过程中具有一定意义,Bcl-2、Bax和Bak蛋白在细胞凋亡中发挥重要作用。本实验旨在通过免疫组织化学方法,检测Bcl-2、Bax和Bak蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况,探讨它们与喉癌的临床指标的关系,探讨三者之间的关系,并从蛋白质水平探讨喉癌手术的安全切缘的范围为临床治疗提供参考。 材料和方法:30例标本是2001年9月-2002年12月手术治疗的喉癌病人的术后石蜡标本,均为鳞状细胞癌,每例病人取4点,分别为癌组织、距癌组织边缘2mm,5mm和10mm;其中男27例,女3例;年龄39-74岁。按UICC(1997)的TNM分期标准,本组病人中T分期:T16例,T211例,T35例,T48例;N分期:N019例,N19例,N22例,N30例:高分化鳞癌14例,中分化11例,低分化5例;声门上型6例,声门型23例,声门下型1例;Ⅰ期6例,Ⅱ期10例,Ⅲ期6例,Ⅳ期8例。取10例声带息肉粘膜作对照。用Bcl-2、Bax和Bak单克隆抗体采用免疫组织化学SP法检测30例喉癌各点和10例对照组的切片中Bcl-2、Bax和Bak的蛋白表达。结果判断标准:Bcl-2、Bax和Bak阳性细胞在细胞浆或细胞膜中呈浅黄至深褐色,Bcl-2、Bax、Bak的细胞表达比率少于10%为阴性(-),10%-25%为弱表达(+),25%-50%为中度表达(++),50%-75%为稍强表达(+++),大于75%为强表达(++++)。统计分析:SPSS统计分析软件检验Bcl-2、Bax和Bak的不同表达与临床指标的关系,比较Bcl-2、Bax、Bak之间的关系,并比较它们在癌组织与癌旁不同距离的表达的关系。 结果与讨论:Bcl-2蛋白阳性细胞呈浅黄至深褐色,阳性反应颗粒定位于细胞浆或细胞膜内,大部分胞浆、少数胞膜着色,Bax蛋白在上皮细胞和间质中均有分布,主要定位于胞浆,胞膜少见,呈淡棕黄色或淡黄色细颗粒状,较Bcl-2着色弱,Bak阳性细胞呈棕色颗粒状,主要位于胞浆中,以弥散分布为主。喉癌第一章:中文摘要组织中Bel一2、Bax、Bak阳性表达率分别为73.33%、60%、53.33%,与年龄、病理分化之间的差异皆有显著性,Bd一2的阳性表达率在小年龄组、病理分级低者中增高(P=0.037、P=0.007),而Bax、Bak的阳性表达率在大年龄组、病理分级中高者中增高(P=0.044、P=0.03;P=0.057、P=0.049).Bel一2的不同表达还与T分期、临床分期有显著性差异。它们与不同的性别、淋巴结转移、临床分型之间的差异皆无显著性。 三种癌基因产物阳性表达率依癌旁10mm一癌旁sml。一癌旁Zmm一癌组织顺序递增,且癌基因蛋白的表达在距肿瘤smnl以内的癌旁组织与癌旁1 Omm处有显著性差异(P<0.05)。 结论:Bcl一2为抑凋亡基因,Bax和Bak为促凋一亡基因,它们可以作为评估喉鳞癌生物学特性的参考指标。Bcl一2蛋白的高表达伴随Bax或Bak蛋白的低表达,Bcl一2/Bax抑凋亡、促凋亡机制失平衡在喉鳞癌中发挥重要作用。喉癌手术切缘趾肿瘤101llm「JJ一能较为安全。