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研究背景和目的：睡眠是人类的一项基本生理活动,到目前为止,睡眠的机制还在探讨研究中。现代医学通过解剖学、神经化学、药理学、生理病理学等一系列研究指出,睡眠周期伴随着脑内一系列物质的规律变化,存在促进睡眠的抑制性物质和促进觉醒的兴奋性物质。中医古籍也早已记录了对睡眠疾病的认识。《内经》以阴阳学说为纲领,奠定了中医睡眠医学的基础,此后的众多医家均以阴阳学说为立论,从各个方面对睡眠进行了发展性的阐释。结合中医与西医对睡眠的认识,我们可以认为,睡眠的发生伴有“阴性”物质的增加,而觉醒的发生是“阳性”物质的增加。本研究的目的是根据阴阳寤寐学说的指导,观察中缝背核内微量注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT和5-HT1A受体阻滞剂WAY100635所产生大鼠下丘脑内睡眠相关物质GLU、GABA及GABAB受体的变化,运用中药右归丸与左归丸平衡脑内物质的改变,探索睡眠时脑内物质可能的变化规律,为阴阳寤寐学说建立生理学基础。实验方法：成年健康雄性SD大鼠(260g-320g),随机分为空白对照组(n=5)、8-OH-DPAT组(n=5)、8-OH-DPAT+右归丸灌胃组(n=5)、8-OH-DPAT+生理盐水灌胃组(n=5)、WAY100635组(n=5)、WAY100635+左归丸灌胃组(n=5)、WAY100635+生理盐水灌胃组(n=5)。大鼠腹腔注射戊巴比妥钠麻醉(35mg/KG),脑立体定位图谱确定中缝背核位置(-7.9mm,0.0mm,-6.4mm),利用脑立体定位仪将微量注射系统套管垂直插入中缝背核中,固定于颅骨后缝合。每只大鼠手术后均休息7天。通过透明导管向中缝背核内微量注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT (100ng,0.4μ l),5-HT1A受体阻滞剂WAY100635(l00ng,0.4μl),灭菌生理盐水(0.4μl),连续微量注射3天后冰上断头处死,取下丘脑检测脑内睡眠物质变化情况,脑干区域留存定位。根据物质变化结果予中药右归饮和左归饮及生理盐水连续灌胃7天后建立8-OH-DPAT+右归丸灌胃组、8-OH-DPAT+生理盐水灌胃组、WAY100635+左归丸灌胃组和WAY100635+生理盐水灌胃组,第8天冰上断头处死,取下丘脑检测脑内睡眠物质变化情况,脑干区域留存定位。采用冰冻切片技术观察脑干立体定位针道；高效液相色谱法测定大鼠下丘脑区域GLU和GABA含量变化;Western Blotting检测下丘脑区域GABAB受体表达量变化。结果：①与空白对照组相比较,8-OH-DPAT组GLU含量降低,GABA含量升高,二者差异显著(p<0.05),下丘脑内抑制性物质占优势；与空白对照组相比,WAY100635组GLU含量升高,GABA含量降低,二者差异显著(p<0.05),下丘脑内兴奋性物质占优势；②与生理盐水灌胃组相比,WAY100635+左归丸灌胃组GLU含量降低,GABA含量升高,两组差异显著(p<0.05)；与生理盐水灌胃组相比,8-OH-DPAT+右归丸灌胃组GLU含量升高,GABA含量降低,两组差异显著(p<0.05)；③与空白对照组相比,WAY100635组的GABABR1a和GABABR1b表达量均降低,差异显著(p<0.05)；8-OH-DPAT组的GABABR1a和GABABR1b受体表达量均升高,差异显著(p<0.05)。④与生理盐水灌胃组相比,WAY100635+左归丸灌胃组、8-OH-DPAT+右归丸灌胃组的GABABR1a和GABABR1b受体表达量未见明显差异(p>0.05),中药灌胃对GABAB表达量影响不显著。结论：①中缝背核内微量注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT引起下丘脑内抑制性神经递质GABA增加,GLU减少。相反的,微量注射5-HT1A受体阻滞剂WAY100635引起GLU增加,GABA减少；②右归丸灌胃降低了抑制性物质含量,左归丸灌胃降低了兴奋性物质含量,最终达到二者平衡。阴阳寤寐学说用于指导中医中药治疗睡眠疾病具有一定疗效；③GABAB受体可能对睡眠的调控具有一定的影响,中药靶点需进一步研究。