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蛋白磷酸酶PP2A是丝/苏氨酸特异性磷酸酶的主要成员,在真核生物中占到50%以上的丝/苏氨酸磷酸酶活性。PP2A的核心酶由36kDa的催化亚基C和65kDa的结构亚基A构成,另外与各种不同的调节亚基B共同组成了全酶复合体。PP2A全酶复合体结构的复杂为其PP2A功能的复杂奠定了基础。PP2A在细胞代谢中具有非常重要的作用,其中包括:细胞周期的调控,细胞增殖与凋亡,生物个体发育,细胞迁移,细胞骨架的动态平衡,信号通路的调节,目前的研究表明,PP2A是重要的肿瘤抑制基因。之前有关PP2A在前列腺癌发生中的作用的研究都集中在催化亚基和调节亚基上,而有关PP2A结构亚基与前列腺癌发生的相关研究处于空白状态。鉴于此种情况,我们实验室比较研究了前列腺癌细胞LNCaP和DU145中结构亚基的表达水平,结果表明PP2A-A?在DU145中的表达显著下降。此外,我们实验室的研究证明,CREB是调节PP2A-A?表达的重要转录因子之一。通过对CREB在前列腺癌LNCa P和DU145细胞中的表达比较分析,我们发现对A?表达起重要正向调节的转录因子CREB的表达在DU145细胞中也明显下调。除了CREB能对A?正向调节外,我们实验室之前的研究还表明,其它转录因子如Sp1和Sp3在人类晶状体上皮细胞和视网膜色素细胞中能参与对PP2A-A?的调节,但是这些转录因子在前列腺癌细胞LNCaP和DU145中是否对PP2A-A?有同样的调节作用,这是本论文探讨的问题。本课题通过以下实验的并得出相应的结果:1)通过对比PP2A-A?以及对应的Sp1和Sp3在前列腺癌细胞LNCaP和DU145中的蛋白水平表达进行分析,说明Sp3可能正向调控PP2A-Aα;Sp1可能负性调节PP2A-Aα。2)通过凝胶迁移滞后(EMSA)实验得到转录因子Sp1/Sp3在体外能结合到PP2A-Aα基因启动子上;3)通过在LNCaP细胞中过表达Sp1以及敲低Sp3后检测细胞中PP2A-A?的蛋白表达水平分析得到过表达Sp1,PP2A-Aα的蛋白表达水平反而降低;敲低Sp3后,PP2A-Aα的蛋白表达水平随之降低;4)通过在DU145细胞中过表达Sp3以及敲低Sp1后检测细胞中PP2A-A?的蛋白表达水平分析得到过表达Sp3,PP2A-Aα的蛋白表达水平随之升高;敲低Sp1后,PP2A-Aα的蛋白表达水平反而升高。本人的研究结果表明:在前列腺癌细胞LNCaP和DU145中,Sp1和Sp3均参与对PP2A-A?表达的调控,但两者的作用有所不同。Sp1负性调节A?在前列腺癌细胞中的表达,而Sp3则正向调节A?的表达。这些实验结果帮助我们进一步了解PP2A-A?基因在前列腺癌细胞中表达的控制机制,并帮助阐明PP2A抗癌的机理,为前列腺癌的治疗供新的信息。