基于“从湿治带”理论辨治妊娠期B族链球菌定植的临床疗效及机制研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghai_007
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目的:1.确证“从湿治带”理论对辨治妊娠期B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)定植的合理性与应用价值。2.基于回顾性临床数据分析,初步揭示本地区妊娠期B族链球菌定植发病率和妊娠结局之间的关联。3.依据前瞻性临床研究,初步把握妊娠期B族链球菌定植患者肠道菌群特征。4.探讨B族链球菌定植的孕妇肠道微生态菌群组成与母体血液常规、新生儿血气分析的关系。5.评价孕安中药复方洗液对妊娠期B族链球菌定植患者的临床疗效、中医证候积分及安全性。6.通过肠道微生态菌群分析,初步揭示孕安中药复方洗液防治妊娠期B族链球菌定植相关并发症的相关机制。方法:1.回顾性临床资料分析收集2017年06月至2018年12月南京医科大学附属明基医院妇产科门诊行GBS常规筛查的孕妇共2343例,分析其GBS定植情况及妊娠相关结局。2.前瞻性临床疗效研究(1)选取60例妊娠期B族链球菌定植患者随机分为:治疗组、对照组,每组各30例。对照组妊娠期未用药,治疗组妊娠期给予孕安中药复方洗液外洗,每日2次,每次200ml,持续用药1周。分娩时两组患者均采用预防性抗生素治疗,分析其中医证候积分,观察其临床疗效,总结其分娩结局,包括母婴并发症等不良事件。(2)筛选GBS菌株予以体外细菌培养,同步进行药物敏感试验。采用孕安中药复方洗液中药体外干预细菌增殖24小时,评估其抑菌圈范围,判断中药组方疗效。3.肠道微生态研究对临床收集到的26例孕妇样本进行肠道微生态研究,根据筛查结果分为阳性组(GBS positive,GBS+)和阴性组(GBS negative,GBS-),其中阳性组12例,阴性组14组。利用16S rDNA测序技术,同时检测上述26例患者和健康人群的血常规、肠道菌群和分娩期新生儿脐带血的血气分析,观察妊娠期B族链球菌定植患者及正常孕妇的肠道菌群特征,分析B组链球菌定植的孕妇肠道微生物群组成与母体血液常规和新生儿血气分析的关系。结果:1.回顾性分析2017年06月至2018年12月南京明基医院妇产科门诊收集的行GBS常规筛查的孕妇数据共2343例,其中GBS阳性患者共110例,计算得出本院妊娠期GBS定植率为4.69%。产后出血、胎膜早破与GBS有关,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄、早产、阴道炎、贫血、糖尿病、甲状腺疾病、衣原体感染、支原体感染与GBS无关,差异无统计学意义(P>0.05)。2.孕母血常规分析GBS阳性组与GBS阴性组之间的血常规检测差异无统计学意义(P>0.05),但OTU水平与炎症指标之间存在显著相关性。OTU80仅与新生儿血气相关,与母体炎症指标无显著相关性。OTU122水平与单核细胞计数值呈正相关(r=0.3966,P=0.0449)。OTU518水平与嗜碱性粒细胞计数值呈正相关(r=0.6096,P=0.0009),而单核细胞比例呈负相关(r=-0.6144,P=0.0008)。OTU375水平与血红蛋白水平呈负相关(r=-4169,P=0.0341)。3.新生儿脐带血的血气分析对比分析两组母亲分娩的新生儿的脐动脉血气发现:OTU水平与脐带动脉血气水平呈显著相关性。GBS 阳性母亲所分娩的新生儿的碳基血红蛋白(FCOHb)明显高于GBS阴性组,其新生儿的高铁血红蛋白(FMetHb)比例则明显低于阴性组。OTU80水平与羧基血红蛋白含量呈正相关(r=0.459,P=0.021),而高铁血红蛋白含量呈负相关(r=-0.51,P=0.009)。OTU518水平与 PCO2 呈负相关(r=-0.4438,P=0.0263)。OTU122 水平与PH值呈正相关(r=0.4133,P=0.04)。OTU375水平与ABE呈负相关(r=-0.5089,P=0.0094)。4.孕安中药复方洗液治疗组的中医证候积分分析(1)连续治疗1周,孕安中药复方洗液治疗组的母婴不良并发症的发病率降低,治疗组近期临床疗效优于对照组(P<0.05)。(2)中医证候积分:B族链球菌阳性组(GBS positive,GBS+)和阴性组(GBS negative,GBS-)的中医证候积分差异有统计学意义(P<0.05)。5.体外细菌培养和药敏实验K-B法分析显示:(1)孕安中药复方洗液联合青霉素对B族链球菌标准质控菌种ATCC13813样本的抑菌环平均值大于青霉素单药抑菌对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);(2)与单独使用孕安中药复方洗液抑菌相比,单纯中药组对标准菌株的抑菌效果明显低于青霉素组,差异有统计学意义(P<0.05)。黄柏对GBS有较强的抑菌能力。(3)孕安中药复方洗液联合青霉素对患者来源的菌种的抑菌环大于青霉素单药抑菌对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)单独使用孕安中药复方洗液组对患者来源的菌种的抑菌效果明显低于青霉素组,差异有统计学意义(P<0.05)。6.肠道微生态研究(1)OUT分析显示:GBS+患者粪便样本的OUT数目少于GBS-对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Venn图分析显示:放线菌门、无壁菌门、厚壁菌门、蓝细菌门、未分类门、拟杆菌门、疣微菌门、糖化菌、互养菌门、变形菌门是微生物群的优势门。说明两组受试者样本的微生物组成相似。仅在GBS+患者检测到黏胶球形菌门、绿菌门、副菌门、绿弯菌门、芽单胞菌门、酸杆菌门、梭菌和纤维杆菌门。(3)多样性分析显示:GBS-组和GBS+组OTU的聚集情况与GBS感染与否存在正相关。(4)Wilcoxon秩和检验分析结果显示:在属分类水平统计各样本的群落物种组成,发现GBS阴性和GBS阳性的患者个体具有不同的微生物群组成,在GBS阳性组别中含有丰富的Dorea多利亚属,Holdemanella霍尔德曼菌属和Oscillibacter颤螺旋菌属。结论:1.通过分析本地区妊娠期B族链球菌定植率及妊娠期母婴并发症情况,提示本地区妊娠期患者GBS定植与胎膜早破及产后出血有关。建议普及GBS筛查知识并妊娠期GBS筛查,有助于防治围产期母婴并发症。2.妊娠期B族链球菌定植患者与健康人群的肠道菌群结构特征存在较为明显的差异。GBS阳性孕妇的肠道菌群OTU丰度较健康者显著降低,并且还检测到黏胶球形菌门、绿菌门、副菌门、绿弯菌门、芽单胞菌门、酸杆菌门、梭菌和纤维杆菌门,提示肠道菌群失衡。因此,肠道微生态异常可能是妊娠期患者B族链球菌定植的发病机制之一。3.妊娠期母体肠道菌群的OTU水平与新生儿脐动脉血气部分指标有显著相关性。妊娠期母体肠道菌群的OTU水平与母体血常规的炎症指标之间也存在显著的相关性。4.孕安中药复方洗液联合抗生素治疗有可能降低B族链球菌的带菌率、预防和阻断B族链球菌的母婴传播,从而改善妊娠结局。
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