胸腔积液白介素16的细胞来源的研究

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目的我们前期研究发现胸腔积液可检测到白介素-16(Interleukin16,IL-16),本研究的目的是探讨胸腔积液中IL-16的细胞来源。方法采用细胞培养方法分离纯化胸腔积液的间皮细胞、瑞氏染色法计数培养细胞纯度及免疫细胞化学染色法鉴定间皮细胞;采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测细胞内细胞因子的技术,在胸腔积液中单个细胞水平上进行细胞膜表面抗原的染色和细胞内IL-16的测定;磁珠分选(Magnetic cell sorting,MACS)从胸腔积液中分离出不同种类的细胞,然后进行细胞培养并收集培养上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-16的浓度。结果1.成功运用细胞培养方法从胸腔积液中分离纯化出高纯度的间皮细胞。2.胸腔积液中各种细胞胞内IL-16显阳性的细胞百分率分别为:CD3~+CD8~-T淋巴细胞为(74.27±15.56)%(n=34);CD3~+CD8~+T淋巴细胞为(69.86±18.55)%(n=34);CD19~+细胞为(45.30±18.77)%(n=15);CD14~+细胞为(18.10±15.87)%(n=15);间皮细胞为(2.05±1.85)%(n=7)。其中,良性组中CD3~+CD8~-T淋巴细胞、CD3~+CD8~+T淋巴细胞IL-16显阳性的细胞百分率[分别为(79.66±10.07)%(n=17)和(77.3±14.64)%(n=17)]均高于恶性组[分别为(68.88±18.34)%(n=17)和(62.42±19.43)%(n=17)],差异均有统计学意义(P<0.05)。3.磁珠分选出胸腔积液不同种类的细胞及培养的间皮细胞,它们培养上清液中IL-16的浓度分别为:CD4~+淋巴细胞为(102.55±42.51)ng/L(n=5),CD8~+淋巴细胞为(92.58±18.34)ng/L(n=5),CD19~+淋巴细胞为(79.85±5.62)ng/L(n=5),CD14~+细胞为(58.51±25.38)ng/L(n=5),间皮细胞为(18.14±8.37)ng/L(n=5)。结论T淋巴细胞包括CD3~+CD8~-T淋巴细胞和CD3~+CD8~+T淋巴细胞是胸腔积液中IL-16的主要来源,CD19~+细胞(B淋巴细胞)和CD14~+细胞(单核/巨噬细胞)是胸腔积液中IL-16的次要来源,而培养的间皮细胞仅有极少量表达。胸腔积液中IL-16的浓度可能与其细胞的种类以及细胞数量有关。
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