论文部分内容阅读
视神经横断造成视网膜神经节细胞（节细胞）不可逆的死亡，导致视觉功能丧失。神经损伤修复的前提是损伤神经元的存活，所以损伤节细胞的存活是视觉功能恢复的先提条件。尽管移植嗅神经鞘细胞（olfactory ensheating cells, OECs）对损伤的节细胞有促进神经再生的作用，但迄今没有报道嗅鞘细胞对损伤的节细胞是否有神经保护作用。因为损伤处距胞体距离的不同，神经元的反应程度也不同，距细胞体越近的损伤，神经元死亡越多。在第一部分实验中我们眶内横断视神经，移植嗅鞘细胞到视神经眶内断端，观察嗅鞘细胞是否对距胞体近距离损伤的节细胞有神经保护作用。实验证明，移植嗅鞘细胞在视神经横断后7天，延迟了节细胞的死亡。但在损伤的2、14天节细胞的存活无明显变化。在第二部分实验中，我们应用实时定量PCR及免疫印迹的方法检测了视网膜及视神经断端内神经营养因子BDNF、 NGF和NT-3及其它因子GDNF、CNTF和LIF的mRNA及BDNF蛋白质的表达。探讨移植嗅鞘细胞保护损伤节细胞的可能机制。结果显示只有BDNF mRNA的水平在移植嗅鞘细胞后7天与对照组相比有显著提高，免疫印迹结果显示移植嗅鞘细胞的BDNF蛋白质表达在同一时间点有显著增加。这表明移植到视神经断端的嗅鞘细胞是通过分泌的BDNF发挥神经保护作用的。锂剂一直被作为精神科用药而长期应用于临床，近年陆续发现长期应用锂剂还具有促进损伤中枢神经系统（包括脑、脊髓和视神经）神经元存活和轴突再生的作用。锂剂这种促进视神经损伤后修复的作用和上调BDNF和cAMP反应元件结合蛋白密切相关。我们不但可以利用锂剂促进中枢神经系统修复作用来修复损伤的视神经，更可借助锂剂上调BDNF表达水平的特性而长期维持移植嗅鞘细胞后视网膜内BDNF的表达水平，进而促进损伤的节细胞长期存活。因此，在第三部分实验中，锂剂和移植嗅鞘细胞联合应用，观察二者用是否对视神经横断后14天的节细胞有神经保护作用。而实验结果表明单独应用锂剂(30mg/kg)或和嗅鞘细胞联合应用都没有促进视神经横断后14天节细胞的存活。即使增加锂剂剂量(85mg/kg)，也不能促进损伤的节细胞存活。然而，单独应用锂剂（30mg/kg）却能促进损伤的节细胞轴突再生进入外周神经移植物。