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在生理情况下，血液中的凝血、抗凝血和纤维蛋白溶解等多个系统间的动态平衡是防止血管内发生血栓的关键，而凝血紊乱在本质上则是各个系统间发生多维度的功能异常和失衡，最终形成大量纤维蛋白，堵塞血管，是导致血栓性疾病的病理基础。另一方面，罹患变应性炎症或严重肝脏疾病的病人同样会发生凝血紊乱，不但加重病情、影响生存质量，还会导致严重临床后果。目前，临床逐渐利用生物标志物对发生凝血紊乱的病人进行风险评估和疗效预测，为药物治疗和长期预防提供依据，但是由于既往临床研究不足，医生们对在不同类型凝血紊乱时生物标志物的变化特征以及与主要病理因素、临床结局的关联性缺乏了解，常出现不合理使用或错误使用的情况。基于此，本研究对多种病理状态下的血液样本进行生物标志物检测，同时通过对相关临床资料进行回顾性随访，借助队列研究阐释生物标志物监测凝血紊乱的临床价值和诊断性能。
主要工作内容如下：
1、采用VIDAS荧光免疫系统检测血浆D-二聚体，利用Kruskal-WallisH检验、U检验、?2检验、Friedman秩和检验、logistic回归分析和Cox回归分析等统计学方法处理数据。结果显示，血浆D-二聚体水平随年龄而增高，其排除诊断静脉血栓栓塞症(VTE)的临界值存在同样的趋势，但诊断敏感性随年龄而降低(从100%降至73.1%)。急性冠脉综合征(ACS)病人的D-二聚体水平均显著高于健康人，其中STEMI、多支病变血管以及左前降支(LAD)堵塞时，D-二聚体水平增高最为显著，并且与病人不良预后相关。在体外循环冠脉搭桥术(OPCAB)后，恢复不良病人D-二聚体在手术后第14天达到峰值，此时D-二聚体的水平变化能反映90天内严重心脏缺血事件的风险，但不能预测手术后1年内严重心脏缺血事件的风险。
2、采用ILACLTOP700型血液凝固仪测定vWF∶Ag水平，利用Kruskal-WallisH检验、U检验、ROC、?2检验、Friedman秩和检验、Kaplan-Meier曲线、Logistic回归分析和Cox回归分析等统计学方法处理数据。结果显示，血管性血友病因子抗原(vWF∶Ag)与OPCAB病人多种病理因素相关，在OPCAB术后第30天的血浆vWF∶Ag临界值可预测OPCAB手术后1年内的严重心血管缺血事件的风险。发现了vWF∶Ag与冠脉介入(PCI)病人多种临床病理因素相关，将临界值设定为312.0%时，血浆vWF∶Ag预测PCI术后病人发生房颤相关缺血性卒中风险的诊断敏感性为94.4%，并能反映抗栓治疗后的凝血紊乱的缓解状态。
3、采用ILACLTOP700型血液凝固仪测定血浆蛋白C活性(PC∶A)，用流式细胞仪检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)，利用方差分析、q检验、ROC、?2检验、Cox回归分析和Kaplan-Meier曲线等统计学方法处理数据。结果显示，哮喘病人的PC∶A水平均显著高于对照组，病情未得到控制病人血浆中PC∶A水平高于病情被控制的患者，利用PC∶A评价病情是否得到完全控制的敏感度为94.7%，特异度为80.7%。哮喘病人在糖皮质激素治疗前，TNF-α、IL-8和ECP水平高于对照组，在治疗2周后均显著降低，可敏感反映治疗效果，对病人疾病发展和严重程度有预测价值。
4、用ILACLTOP700型血液凝固仪、颗粒过滤法和AcuStar发光分析仪测定不同类型的肝素诱导的血小板减少症抗体(HIT-Ab)，用U检验、ROC、?2检验和Kaplan-Meier曲线等统计学方法处理数据。结果显示，混合HIT-Ab(定量)和IgG型HIT-Ab诊断HIT的敏感性均为100%，上调临界值均可提高两个试验的诊断特异性。合并血栓栓塞的HIT病人的IgG型HIT-Ab水平显著高于孤立性HIT病人，以2.32U/ml为临界值，高于此水平的病人在15天内发生血栓栓塞事件的概率显著增高(Log-rankχ2=56.577，P＜0.001)，诊断敏感度为90.9%，特异度为80.0%。在HIT高风险病人中，混合HIT-Ab(定性)阳性率＞混合HIT-Ab(定量)＞IgG型HIT-Ab；在非HIT病人中，IgG型HIT-Ab的特异性优于混合HIT-Ab(定量)，混合HIT-Ab(定量)优于混合HIT-Ab(定性)。
5、用ILACLTOP700型血液凝固仪检测各项止血指标，用流式细胞仪分析骨髓样细胞白介素-1，用VIDAS荧光免疫系统检测血浆D-二聚体，用U检验、ROC、Kruskal-WallisH检验、Kaplan-Meier曲线和?2检验等统计学方法处理数据。结果显示，肝癌病人抗凝血蛋白质活性显著低于对照组，t-PA∶A、PAI∶A、vWF∶Ag、FⅧ∶A、FIB、PT和APTT显著高于对照组，结果表明肝癌病人存在多系统失衡。在临床监测中，骨髓样细胞白介素-1可作为监测肝癌疗效的敏感指标；血浆D-二聚体预测肝癌病人发生门静脉血栓(PVT)风险的临界值为549.5μg/L时，敏感度为100%，特异度67.1%，可用于对门静脉血栓风险做排除诊断。
主要工作内容如下：
1、采用VIDAS荧光免疫系统检测血浆D-二聚体，利用Kruskal-WallisH检验、U检验、?2检验、Friedman秩和检验、logistic回归分析和Cox回归分析等统计学方法处理数据。结果显示，血浆D-二聚体水平随年龄而增高，其排除诊断静脉血栓栓塞症(VTE)的临界值存在同样的趋势，但诊断敏感性随年龄而降低(从100%降至73.1%)。急性冠脉综合征(ACS)病人的D-二聚体水平均显著高于健康人，其中STEMI、多支病变血管以及左前降支(LAD)堵塞时，D-二聚体水平增高最为显著，并且与病人不良预后相关。在体外循环冠脉搭桥术(OPCAB)后，恢复不良病人D-二聚体在手术后第14天达到峰值，此时D-二聚体的水平变化能反映90天内严重心脏缺血事件的风险，但不能预测手术后1年内严重心脏缺血事件的风险。
2、采用ILACLTOP700型血液凝固仪测定vWF∶Ag水平，利用Kruskal-WallisH检验、U检验、ROC、?2检验、Friedman秩和检验、Kaplan-Meier曲线、Logistic回归分析和Cox回归分析等统计学方法处理数据。结果显示，血管性血友病因子抗原(vWF∶Ag)与OPCAB病人多种病理因素相关，在OPCAB术后第30天的血浆vWF∶Ag临界值可预测OPCAB手术后1年内的严重心血管缺血事件的风险。发现了vWF∶Ag与冠脉介入(PCI)病人多种临床病理因素相关，将临界值设定为312.0%时，血浆vWF∶Ag预测PCI术后病人发生房颤相关缺血性卒中风险的诊断敏感性为94.4%，并能反映抗栓治疗后的凝血紊乱的缓解状态。
3、采用ILACLTOP700型血液凝固仪测定血浆蛋白C活性(PC∶A)，用流式细胞仪检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)，利用方差分析、q检验、ROC、?2检验、Cox回归分析和Kaplan-Meier曲线等统计学方法处理数据。结果显示，哮喘病人的PC∶A水平均显著高于对照组，病情未得到控制病人血浆中PC∶A水平高于病情被控制的患者，利用PC∶A评价病情是否得到完全控制的敏感度为94.7%，特异度为80.7%。哮喘病人在糖皮质激素治疗前，TNF-α、IL-8和ECP水平高于对照组，在治疗2周后均显著降低，可敏感反映治疗效果，对病人疾病发展和严重程度有预测价值。
4、用ILACLTOP700型血液凝固仪、颗粒过滤法和AcuStar发光分析仪测定不同类型的肝素诱导的血小板减少症抗体(HIT-Ab)，用U检验、ROC、?2检验和Kaplan-Meier曲线等统计学方法处理数据。结果显示，混合HIT-Ab(定量)和IgG型HIT-Ab诊断HIT的敏感性均为100%，上调临界值均可提高两个试验的诊断特异性。合并血栓栓塞的HIT病人的IgG型HIT-Ab水平显著高于孤立性HIT病人，以2.32U/ml为临界值，高于此水平的病人在15天内发生血栓栓塞事件的概率显著增高(Log-rankχ2=56.577，P＜0.001)，诊断敏感度为90.9%，特异度为80.0%。在HIT高风险病人中，混合HIT-Ab(定性)阳性率＞混合HIT-Ab(定量)＞IgG型HIT-Ab；在非HIT病人中，IgG型HIT-Ab的特异性优于混合HIT-Ab(定量)，混合HIT-Ab(定量)优于混合HIT-Ab(定性)。
5、用ILACLTOP700型血液凝固仪检测各项止血指标，用流式细胞仪分析骨髓样细胞白介素-1，用VIDAS荧光免疫系统检测血浆D-二聚体，用U检验、ROC、Kruskal-WallisH检验、Kaplan-Meier曲线和?2检验等统计学方法处理数据。结果显示，肝癌病人抗凝血蛋白质活性显著低于对照组，t-PA∶A、PAI∶A、vWF∶Ag、FⅧ∶A、FIB、PT和APTT显著高于对照组，结果表明肝癌病人存在多系统失衡。在临床监测中，骨髓样细胞白介素-1可作为监测肝癌疗效的敏感指标；血浆D-二聚体预测肝癌病人发生门静脉血栓(PVT)风险的临界值为549.5μg/L时，敏感度为100%，特异度67.1%，可用于对门静脉血栓风险做排除诊断。