背景：细胞因子融合蛋白可以增加抗体效应细胞对靶细胞的杀伤作用，因此在科研和临床中越来越受到重视。重组DNA技术、人类基因组计划的完成使得许多疾病靶位日渐明朗，而对免疫系统机制的逐渐了解也使得细胞因子在许多疾病治疗中的应用前景十分可观。白细胞介素4（Interleukin-4，IL-4）在抗肿瘤免疫治疗方面具有很大潜力，与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）协同作用可以诱导单核细胞分化为树突状细胞（Dendritic cell，DC），从而提高抗原呈递能力，并诱导出特异性效应T细胞，增强细胞免疫水平。白细胞介素6（Interleukin-6，IL-6）也是一种重要的细胞因子，它具有广泛的生物学效应，能诱导B细胞分化并分泌免疫球蛋白IgG，刺激T淋巴细胞及胸腺细胞的活化，此外，还具有诱导NK细胞、巨噬细胞、造血干细胞等细胞分化和分泌活性因子的作用。　　 目的：克隆小鼠IL-4和6基因，构建重组原核表达载体，载体上自带his、sumo和trx等多重融合标签，在大肠杆菌中进行高效可溶表达，通过分离纯化得到高纯度的融合蛋白，为研究其生物学功能提供良好的条件。　　 方法：提取小鼠脾脏淋巴细胞总RNA，RT-PCR得到小鼠IL-4和6基因片段，TA克隆后进行序列测定。随后将目的基因连接到原核表达载体上，利用BL21大肠杆菌高效表达可溶性融合蛋白，采用亲和层析等方法对所表达的蛋白进行分离纯化，并通过SDS-PAGE，Western-Blotting和细胞因子活性测定等方法对重组mIL-4/6进行鉴定。　　 结果：克隆后的基因片段经DNA测序，其结果与文献报道完全一致。将重组质粒转化Ecoli BL21（DE3），并对诱导条件进行优化，确定在14℃和1mM IPTG诱导条件下，可溶性蛋白的表达量明显高于37℃诱导的结果。重组mIL-4/6工程菌大量表达，超声裂解菌体后的上清液经亲和层析纯化、脱盐处理后，目的蛋白纯度达98．3％/96．1％，最终得到纯品10．19mg/9．26mg。IL-4生物学活性检测结果表明IL-4重组蛋白具有刺激T细胞增殖的功能。　　 结论：构建了高效表达mIL-4/6的工程菌，目的蛋白部分为可溶表达，为进一步研究IL-4/6的生物学功能及应用奠定基础。