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背景: 各种青光眼的共同病理学机制是视网膜神经节细胞(retina ganglion cells，RGCs)的凋亡和神经纤维的变性，从而造成不可逆的视功能损伤。由于多种因素的影响，如神经营养因子缺乏，胶质瘢痕形成以及髓鞘相关抑制蛋白再生抑制作用等，包括视神经在内的中枢神经系统(Central nervous system，CNS)损伤后难以再生。已有研究证实髓鞘相关抑制蛋白Nogo—A是阻碍CNS损伤后神经元存活和再生的重要因素之一。Nogo—A是通过与受体复合物NgR/p75/Lingo—1的结合而发挥轴突再生抑制作用的，因此研究Nogo—A及其受体NgR在正常眼和高眼压模型眼的视神经和视网膜中表达情况，观察阻滞髓鞘相关抑制蛋白的作用通路对青光眼性视神经损伤的影响，有可能为青光眼视神经损伤的治疗提出新的思路。
目的:
1、了解髓鞘相关抑制蛋白Nogo—A及其受体NgR在正常成年大鼠视网膜和视神经中表达和分布的情况。
2、观察Nogo—A及其受体NgR的mRNA和蛋白在急性和慢性高眼压模型大鼠视网膜和视神经中表达变化的情况。
3、探讨NgR基因沉默对慢性高眼压模型大鼠视神经损伤后轴突再生的影响。
方法:
1、应用免疫组织化学方法，了解Nogo—A及其受体NgR在正常成年大鼠视网膜和视神经中表达和分布的情况。
2、建立急性和慢性高眼压大鼠模型。
3、应用RT-PCR和Western Blot方法分别了解Nogo—A及其受体NgR在急性和慢性高眼压模型大鼠造模后不同时间视网膜和视神经中转录水平和蛋白质水平表达变化的情况。
4、采用siRNA玻璃体腔内注射的方法，检测特异性沉默NgR基因表达情况，应用Western Blot方法观察轴突再生特异性蛋白GAP—43表达的变化。
结果:
1、Nogo—A在正常成年大鼠的视神经和视网膜的神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层、内核层、外丛状层、外核层内均有表达。NgR在正常成年大鼠的视神经和视网膜的神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层内表达。
2、急性高眼压模型大鼠的视神经和视网膜组织中Nogo—A mRNA及蛋白的表达在造模后1d、3d明显增加(与对照组相比，P<0.05)，其后7d、14d又降至正常水平。慢性高眼压模型大鼠视神经和视网膜组织中Nogo—A mRNA及蛋白的表达在造模后3d即有增加，7d后增加显著，并持续至造模后14d和28d(与对照组相比，P<0.05)。急性和慢性高眼压模型大鼠造模后不同时间，NgRmRNA和蛋白在视神经和视网膜组织中的表达未见明显变化。
3、在慢性高眼压模型大鼠中，于玻璃体腔内注射特异siRNA干扰NgR基因表达，在mRNA及蛋白翻译水平都实现了基因沉默，轴突再生特异性蛋白GAP—43的表达上调。
结论:
1、Nogo—A及其受体NgR在正常成年大鼠的视神经和视网膜中广泛分布。
2、急性和慢性高眼压可以促使大鼠Nogo—A mRNA和蛋白的表达上调，表明Nogo—A在高眼压导致的视神经损伤的神经再生过程中发挥着重要作用。
3、在急性和慢性高眼压模型大鼠中，NgR mRNA和蛋白的表达未见明显改变。但是化学合成的NgR特异性siRNA能够抑制慢性高眼压模型大鼠视网膜中NgR mRNA和蛋白的表达水平，使视网膜轴突再生特异性蛋白GAP—43的表达上调，促进高眼压性视神经损伤的神经再生。表明NgR在高眼压性视神经损伤中发挥作用。NgR siRNA有可能成为未来青光眼视神经保护药物。