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目的:随着经济的增长和生活水平的提升,肥胖症的患病率不断上升,与高血压、高血脂、高血糖并称为“死亡四重奏”。肥胖患者易合并心脑血管疾病、脂肪肝等严重影响患者的身心健康。为应对肥胖带来的世界性医疗社会问题,急需更高效、安全的治疗手段。土茯苓为百合科植物光叶菝葜的干燥根茎。作为根茎类的药材,其中含有大量的糖类成分。而多糖为天然产物,来源广泛,具有毒副作用小、无残留、不易产生耐药性等优点。研究表明土茯苓多糖具有抗炎、免疫调节等作用,然而国内外少有土茯苓多糖减肥降脂的相关报道。本研究以秀丽隐杆线虫为模式生物,以脂质代谢及氧化应激等方面为切入点对土茯苓多糖的降脂活性进行实验研究,可为土茯苓多糖的减肥降脂及抗脂质过氧化研究提供一定实验依据。方法:1.以野生型(N2)秀丽隐杆线虫作为活体模型,考察不同浓度的土茯苓多糖对其脂肪代谢的影响:通过油红0染色法、苏丹黑染色法评估土茯苓多糖对野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内脂肪积累的影响;通过活性氧荧光探针检测野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内ROS水平,测定野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)含量以及脂肪代谢相关基因的表达含量,初步探讨土茯苓多糖的减肥降脂机制。2.以基因敲除的突变型秀丽隐杆线虫NHR-80(BX165)为模型,测定土茯苓多糖对各突变型秀丽隐杆线虫体内TG含量的影响,进一步明确其可能机制。结果:1.油红0染色结果显示,与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orlistat组野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的着色范围小,颜色浅,脂滴集聚明显较少。与Orlistat组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组的野生型(N2)秀丽隐杆线虫皮下组织着色明显减少,脂滴主要集聚在肠道,且着色更浅,脂滴集聚少。苏丹黑染色结果显示,与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orlistat组野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的着色颜色浅,脂滴集聚相对较少。但差异较油红0染色不明显。与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orlistat组给药后,野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的体内TG含量减少(P<0.01)。2.与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orl istat组给药后,活性氧(ROS)荧光探针检测土茯苓多糖各剂量组及Orlistat组野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的荧光强度明显减弱。且土茯苓多糖各剂量组随着药物浓度的上升,野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的荧光强度越弱;与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orlistat组给药后,野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的体内MDA含量减少(P’<0.01),SOD含量增加(P’<0.01或P’<0.05)。3.RT-qPCR结果显示,与空白组对比,不同浓度土茯苓多糖给药组与Orlistat组均能明显降低野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内FAT-2、NHR-80、SBP-1基因的表达,结果具有统计学差异(P’<0.01或P’<0.05)。4.测定不同浓度土茯苓多糖对基因敲除的突变型秀丽隐杆线虫NHR-80(BX165)体内TG含量的影响,结果发现NHR-80(BX165)突变型秀丽隐杆线虫体内TG含量与空白组对比无明显差异(P’>0.05)。结论:土茯苓多糖可以显著减少野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内脂滴集聚,降低线虫体内TG含量,提示土茯苓多糖确有减少线虫体内脂肪积累的作用。此外,土茯苓多糖可以显著减少线虫体内ROS和MDA含量,增加SOD含量,提示土茯苓多糖可有效缓解野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内的脂质过氧化水平。同时,土茯苓多糖可抑制野生型(N2)秀丽隐杆线虫体内FAT-2、NHR-80、SBP-1的基因表达,在敲除秀丽隐杆线虫体内NHR-80基因后,土茯苓多糖不同浓度给药组均不能降低秀丽隐杆线虫体内TG含量。提示土茯苓多糖通过抑制FAT-2、NHR-80、SBP-1的基因表达,减少脂肪累积,其作用机制可能与NHR-80更为相关。总而言之,土茯苓多糖具有明显的减肥降脂活性,其调节机制可能主要通过抑制FAT-2、NHR-80、SBP-1的基因表达,使线虫体内的饱和脂肪酸去饱和,抑制脂类合成,增强代谢效率,并有效缓解秀丽隐杆线虫体内的脂质过氧化水平,减少脂肪积累,从而达到减肥降脂的目的。