【摘 要】
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该研究探索了蛋白酶催化胸腺五肽前体二肽Bz-Arg-Lys和Cbz-Val-Tyr的合成反应条件的优化及产物分离方法.在Bz-Arg-Lys二肽的合成中,我们根据底物专一性特点选择胰蛋白酶作为
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该研究探索了蛋白酶催化胸腺五肽前体二肽Bz-Arg-Lys和Cbz-Val-Tyr的合成反应条件的优化及产物分离方法.在Bz-Arg-Lys二肽的合成中,我们根据底物专一性特点选择胰蛋白酶作为催化该肽键合成的催化剂,利用Lys-OH作为亲核底物,以尽可能减少Lys-Lys副产物的产生,进而考察了溶剂体系、时间、温度、pH值、水含量等因素对二肽产率的影响,对反应条件进行优化,建立了最佳反应模型:胰蛋白酶在乙醇体系中;pH为8.0(0.1mol/LTris-HCl缓冲液);含水量为20﹪;温度为35℃;反应时间为6小时.得到Bz-Arg-Lys二肽产率为52.3﹪.继而利用分子筛凝胶柱层析对产物进行分离纯化,得到纯度为85.91﹪的二肽产品.在Cbz-Val-Tyr二肽的合成中,我们通过对不同蛋白酶催化能力,及溶剂、反应时间、水含量、温度等因素的考察,对反应条件进行优化,建立了最佳反应模型:木瓜蛋白酶在乙酸乙酯体系中催化;pH为5.0(0.1mol/L柠檬酸缓冲液);含水量为5﹪;温度为30℃;反应时间为4小时.在最佳的条件下,得到高效液相监测产率为46.7﹪.并初步的对反应产物的分离条件进行了摸索.该文在优化反应条件的同时还对影响蛋白酶催化肽腱形成的因素进行了理论上的探讨,为今后的工作奠定了基础.
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