论文部分内容阅读
目的:探讨高原地区不同海拔高度大鼠严重烧伤延迟复苏后氧化应激反应对肠屏障结构的影响。方法:将Wistar大鼠132只分为兰州组(1517m)和高原组(3840 m),兰州组包括兰州即时复苏组(LIFR,n=30)、兰州延迟复苏组(LDFR,n=30)、兰州假伤组(LCG,n=6),高原组包括高原即时复苏组(HIFR,n=30)、高原延迟复苏组(HDFR,n=30)、高原假伤组(HCG,n=30)。大鼠背部30%TBSA(总体表面积)Ⅲ度烫伤后,立即或伤后6h液体复苏,分别于伤后6h,12h,24h,48h和72h取材。采用组织病理学观察、原位末端标记(TUNEL)法、免疫组织化学染色与图象分析技术,在动态观察小肠粘膜病理学变化的基础上,观察不同海拔高度严重烧伤延迟复苏后小肠粘膜中丙二醛(MDA)和总巯基(TSH)变化及凋亡相关基因bax、bcl-2、HIF-1α蛋白表达的变化。并检测了不同海拔高度严重烧伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡率(原位末端标记法)。探讨肠上皮细胞中的MDA、TSH含量变化及凋亡相关基因bax、bcl-2、HIF-1α蛋白表达变化与肠上皮细胞凋亡的关系。结果:1.随着海拔高度的增加,HE染色可见大鼠烧伤后小肠粘膜出现肿胀且有炎性细胞浸润,小肠粘膜结构紊乱,肠粘膜内空泡样结构逐渐增多,并可见凋亡小体,HDFR组较LDFR组变化明显。2.大鼠烧伤后小肠粘膜中MDA含量显示高原实验组高于兰州实验组(P＜0.05);两个高度大鼠烧伤后小肠粘膜中MDA含量示延迟复苏组(DFR)高于即时复苏组(IFR)(P＜0.05);在伤后12h,小肠粘膜MDA含量最高(P＜0.01);伤后实验各组MDA含量均高于假伤组(CG)(P＜0.01);这与小肠粘膜中TSH含量变化相反;3.肠上皮细胞中bax、bcl-2、HIF-1α蛋白表达检测阳性染色均位于细胞核或胞浆,bax、HIF-1α蛋白表达强度实验组高于对照组,随海拔梯度上升大鼠伤后bax、HIF-1α蛋白表达增强,各海拔高度DFR组表达强度高于IFR组(P＜0.05),在海拔3840m DFR组伤后12h表达最强;bcl-2基因表达高原地区致伤动物均为阴性结果,兰州地区伤后6h,12h为阴性表达,其他情况为弱阳性表达。4.TUNEL法检测凋亡细胞显示凋亡细胞阳性染色主要位于细胞核,随海拔梯度上升大鼠伤后小肠上皮细胞凋亡率增高,各海拔高度DFR组肠上皮细胞凋亡率高于IFR组(P＜0.05),在海拔3840m DFR组12h表达最高;5.HDFR组MDA含量与bax表达强度的变化呈显著正相关(r=0.938,P＜0.05)、与细胞凋亡光密度值呈显著正相关(r=0.899,P＜0.05);TSH含量与与HDFR组bax表达强度的变化呈显著负相关(r=-0.934,P＜0.05)、与细胞凋亡光密度值呈显著负相关(r=-0.948,P＜0.05)。结论:1.随海拔高度的增加,高原组大鼠严重烧伤延迟复苏后肠粘膜病理学损伤较兰州组明显加重;2.氧化应激反应是高海拔地区大鼠严重烧伤延迟复苏肠屏障损伤的重要因素;3.bax和bcl-2表达变化可能是高原大鼠严重烧伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡的重要调节机制之一;4.HIF-1α表达变化与高原大鼠严重烧伤延迟复苏后肠上皮细胞凋亡密切相关;5.高原地区不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠小肠上皮细胞凋亡数量随海拔梯度升高而增加。