冰片对RPE细胞间紧密连接影响的研究

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目的:通过研究冰片对体外培养的兔视网膜色素上皮(retinal pigmentepithelial,RPE)细胞间紧密连接的影响,探索冰片开放血眼屏障作用可能存在的机制,为冰片在临床上的进一步应用提供理论依据。   方法:取兔龄一个月左右的有色兔,进行RPE细胞的原代培养、传代培养及鉴定;取第二代培养良好的细胞,利用Transwell小室建立体外培养的RPE细胞间紧密连接屏障模型;通过透射电子显微镜和跨上皮电阻测定仪检测冰片对体外培养的RPE细胞间紧密连接屏障模型的影响。实验分组:冰片血清作用4小时组、冰片血清作用24小时组、不含冰片血清作用4小时对照组和不含冰片血清作用24小时对照组;利用透射电子显微镜和跨上皮电阻测定仪观察上述四组RPE细胞间紧密连接的变化情况。   结果:透射电子显微镜观察显示:冰片血清作用组与不含冰片血清作用对照组比较,RPE细胞间紧密连接间隙明显增大,紧密连接数目较少。跨上皮电阻测定仪检测显示:冰片作用4小时组和冰片作用24小时组的跨细胞电阻(transmembrance electric resistance,TER)值小于不含冰片血清作用4小时对照组和不含冰片血清作用24小时对照组的TER值,差异有统计学意义(P<0.01);冰片作用24小时组的TER值小于冰片作用4小时组的TER值,差异有统计学意义(P<0.01);不含冰片血清作用4小时对照组和不含冰片血清作用24小时对照组TER值无明显变化,无统计学意义。   结论:冰片对体外培养的兔RPE细胞间紧密连接屏障模型有影响,能够开放RPE细胞间的紧密连接,使RPE细胞间紧密连接间隙明显增大,紧密连接数目减少。
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