钙是动物体内含量最丰富的矿物质元素之一,具有形成骨骼和牙齿,维持肌肉和神经兴奋性等诸多功能。五羟色胺酸（5-Hydroxy-L-tryptophan,5-HTP）是L-色氨酸转化为五羟色胺（5-HT）的主要产物。5-HT被认为是哺乳期骨转换调节器,在诱导骨调节因子、维持骨密度、引发骨重塑等方面发挥着重要作用。Micro RNAs（miRNAs）是一类天然的非编码小分子RNA,通过调控靶基因的表达影响钙代谢等一系列生理过程。质膜钙ATP酶1（Plasma membrane calcium ATPase1,ATP2B1）是一类高亲和力的钙泵,在维持细胞Ca²⁺稳态中发挥重要作用。本课题组前期试验对6只奶山羊分别从产前7天开始注射5-HTP（处理组）或生理盐水（对照组）,采集分娩当天的血液样品进行了全转录组测序,本研究利用全转录组测序数据,首先筛选出受5-HTP调控且参与钙代谢的miRNAs,然后通过生物信息学预测和分子细胞生物学等多种方法,验证5-HTP通过miRNA及其靶基因调控山羊乳腺上皮细胞（GMECs）中钙离子水平的分子机制。主要获得以下结果:1. 全转录组测序分析显示5-HTP注射后山羊血液中miR-99a-3p表达上调（p（27）0.05）;用5-HTP处理离体培养的山羊乳腺上皮细胞发现,5-HTP处理可增加细胞中miR-99a-3p的表达水平（p（27）0.05）。2. 生物信息学分析显示ATP2B1基因是miR-99a-3p的靶基因之一,进一步抑制或过表达山羊乳腺上皮细胞中miR-99a-3p的表达水平可导致ATP2B1基因m RNA和蛋白水平升高或降低（p（27）0.05）,证明miR-99a-3p靶向调控ATP2B1基因的表达。3. 通过干扰RNA抑制山羊乳腺上皮细胞中的ATP2B1基因,细胞内钙离子水平增加（p（27）0.05）。4. 抑制山羊乳腺上皮细胞中的miR-99a-3p的同时干扰ATP2B1基因的试验发现,miR-99a-3p通过降低ATP2B1基因的表达增加细胞内钙离子水平（p（27）0.05）。以上研究结果表明,5-HTP通过miR-99a-3p/ATP2B1增加山羊乳腺上皮细胞中钙离子水平,提示这可能是产前注射5-HTP提高羊奶中钙离子水平的分子作用机制之一。该结果为进一步揭示哺乳动物围产期钙代谢平衡调控机制积累了资料。