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在我国，膀胱肿瘤作为泌尿系统发病率最高的肿瘤，术后复发率高是其特点之一。研究表明，膀胱肿瘤复发机制可能与肿瘤细胞不易被外周T细胞识别，在微环境中过量分泌负性细胞因子，且患者自身免疫监视能力下降，最终发生免疫逃逸有关。以目前手术为主，膀胱灌注化疗为辅的治疗方案，并不能完全防止膀胱肿瘤的复发和进展。树突状细胞(dendritic cells, DCs)是目前已知的人体内抗原递呈能力最强的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC)，能有效活化初始T细胞，在启动免疫应答中起关键性作用；围绕如何修饰DCs抗原递呈能力，优化肿瘤患者DCs免疫功能的研究已成为肿瘤免疫治疗的热点之一。程序性死亡配体1(Programmed death ligand1,PD-L1)是肿瘤细胞过表达的负性共刺激分子，能与程序性死亡分子(PD-1)结合成PD-L1/PD-1，负向调节T细胞受体介导的信号转导和细胞因子的分泌，导致T细胞功能的瘫痪。近年来，研究PD-L1与膀胱肿瘤复发的机制，以及构建与PD-L1相关的DCs疫苗一直是本研究小组的重点方向之一。研究目的：1.探讨膀胱肿瘤患者外周血DCs表型和免疫功能的改变；2.通过阻断PD-L1通路，观察膀胱肿瘤患者外周血DCs免疫功能的变化，探讨PD-L1与膀胱肿瘤发生免疫逃逸的关系。材料和方法：1.外周血DCs表型和免疫功能检测：取膀胱肿瘤患者和正常人外周血，进行密度梯度离心分离，应用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Recombinant humangramulocyre-macrophage， rhGM-CSF)和重组人白介素4(Recombinant humanInterleukin-4，rhIL-4)进行体外诱导培养DCs，并从形态学和表型两方面对所培养细胞进行鉴定；采用流式细胞仪检测两组DCs表达PD-L1、CD1a、HLA和CD83的变化；应用混合淋巴细胞反应检测其刺激T淋巴细胞增殖能力；酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA法)检测其分泌IL-10和IL-12的变化。2.阻断PD-L1通路的体外干预试验：DCs分组如下：A组：正常人外周血DCs；B组：膀胱肿瘤患者外周血DCs；C组：膀胱肿瘤患者DCs+PD-L1单抗(5ug/ml)；D组：膀胱肿瘤患者DCs+脂多糖(1ug/ml)(Lipopolysaccharide，LPS)。分别进行体外培养后，同上述方法检测各组DCs表达CD1a、HLA、CD83，刺激淋巴细胞增殖以及分泌IL-10和IL-12的变化。结果：1.膀胱肿瘤患者外周血DCs表达PD-L1阳性率，分泌IL-10含量均显著高于正常组[(95.06±4.06)%和(76.63±6.90)%，(214.00±13.75)pg/mL和(83.78±7.95)pg/ml](P<0.05)，DCs表达CD83阳性率及刺激淋巴细胞增殖的增殖指数均分别低于正常组[(16.20±1.91)%和(35.53±1.58)%，(1.50±0.45)和(2.14±0.70)](P<0.05)。2.阻断PD-L1通路后膀胱肿瘤患者外周血DCs表达CD83阳性率较正常组无明显变化[(17.60±3.09)%和(16.21±1.91)%](P>0.05)，然而DCs刺激淋巴细胞增殖的能力较正常组明显增强(4.00±1.28和1.49±0.45)，分泌IL-12能力增强[(108.30±21.89)pg/ml和(37.17±14.89)pg/ml]，而分泌IL-10的能力减弱(108.90±21.77)pg/ml和(214.99±54.99)pg/ml](P<0.05)。结论：1.膀胱肿瘤患者外周血DCs高表达负性共刺激分子PD-L1，过度分泌IL-10及低表达CD83可能与膀胱肿瘤发生免疫逃逸有关。2.阻断PD-L1通路，可促进IL-12、抑制IL-10的分泌，诱导TH1型免疫漂移的发生，增强未成熟DCs刺激淋巴细胞增殖的能力。