柯萨奇病毒B3感染Hela细胞后Bax、Bim、Caspase-3及Caspase-9 mRNA及蛋白的表达

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:renjie1986
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目的观察CVB3感染Hela细胞后促凋亡基因Bax、Bim Caspase-3及caspase-9mRNA和蛋白表达的变化。方法将Hela细胞分为未予CVB3感染的对照组和CVB3感染的病毒组,取3h、6h、9h、12h、24h共5个时间点,采用RT-PCR、 Western Blot分别检测Bax、Bim、Caspase-3及caspase-9mRNA和蛋白的表达。结果1.Bax、Bim、Caspase-3及Caspase-9mRNA在对照组和病毒组Hela细胞中均有表达,且在各自组内差异均无显著性(P>0.05);病毒组Bax、Bim mRNA表达在24h时间点均低于对照组(P<0.05)。对照组与病毒组中Caspase-3、Caspase-9mRNA在组内各时间点间的表达差异均无显著性(P>0.05);病毒组Caspase-9mRNA表达较在24h时间点较对照组降低(P<0.05),而Caspase-3mRNA表达组间各时间点比较差异无显著性(P>0.05)。2. Bax、Bim、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达在对照组中各时间点均有表达,但差异均无显著性(P>0.05)。在病毒组中,Bax蛋白在24h时间点表达下降,与组内各时间点比较差异均有显著性(P<0.05),且病毒组表达明显低于对照组(P<0.05);Bim蛋白表达随感染时间延长而下降(P<0.05),且组间比较9h、12h、24h时间点蛋白表达病毒组低于对照组(P<0.05)。病毒组Caspase-3及Caspase-9蛋白表达均在24h点明显降低(P<0.05),且低于对照组24h时间点(P<0.05);此外在对照组中Cleaved Caspase-9蛋白表达在12h点明显高于其他各时间点(P<0.05);病毒组Cleaved Caspase-9蛋白表达在3h及6h点与9h、12h、24h时间点间比较差异有显著性(P<0.05),组间比较9h、12h时间点明显高于对照组(P<0.05)、而24h点明显低于对照组(P<0.05);将Cleaved Caspase-9蛋白表达值与Caspase-9蛋白表达值比较,对照组中Cleaved Caspase-9/Caspase-9表达在12h时间点增高,差异有显著性(P<0.05),病毒组中Cleaved Caspase-9/Caspase-9表达在3h、6h、9h各时间点比较,差异无显著性(P>0.05),但是随感染时间的延长表达增强,至12h时间点出现增高,24h时间点明显增强。结论1.CVB3感染Hela细胞后Bax、Bim mRNA在24h时间点表达降低;Bax蛋白表达在病毒感染后24h时间点明显降低,而Bim蛋白表达随感染时间延长而下降,至24h时间点明显下降。2.CVB3感染Hela细胞后Caspase-3mRNA表达无明显变化,而Caspase9mRNA在24h时间点表达降低;Caspase-3、Caspase-9蛋白表达均在病毒感染后24h时间点降低,而Cleaved Caspase-9蛋白表达在病毒感染后12h时间点最强。3. Bax、Bim、Caspase-3、Caspase-9均在CVB3诱导的Hela细胞凋亡中发挥作用。
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