【摘 要】
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粉棒束孢（Isaria farinosa）是一种常见的昆虫病原真菌,已被用作生物防治武器,用于防治温带农林害虫、植物病原微生物以及线虫等。同时,粉棒束孢作为冬虫夏草中的定殖真菌,严重危害冬虫夏草的（Ophiocordyceps sinensis）寄主蝙蝠蛾幼虫的饲养,引起了资源昆虫研究者的高度重视,并采取措施进行控制。本论文利用根癌农杆菌介导转化（ATMT）方法构建粉棒束孢DGPH5品系的突变子库
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粉棒束孢（Isaria farinosa）是一种常见的昆虫病原真菌,已被用作生物防治武器,用于防治温带农林害虫、植物病原微生物以及线虫等。同时,粉棒束孢作为冬虫夏草中的定殖真菌,严重危害冬虫夏草的（Ophiocordyceps sinensis）寄主蝙蝠蛾幼虫的饲养,引起了资源昆虫研究者的高度重视,并采取措施进行控制。本论文利用根癌农杆菌介导转化（ATMT）方法构建粉棒束孢DGPH5品系的突变子库,通过测定不同因素对转化效率的影响,优化农杆菌介导转化的条件,测定转化子的特征,以黄粉虫幼虫测定转化子毒力,为冬虫夏草人工培养过程中控制粉棒束孢污染提供科学依据。利用ATMT方法成功构建了粉棒束孢突变子库,优化转化参数分生孢子浓度为10~4个/m L,农杆菌OD600为0.6,共培养温度为25℃的条件下粉棒束孢的插入转化效率为每10~4个/m L个分生孢子可获得10-80个转化子;乙酰丁香酮（AS）对粉棒束孢ATMT的预培养和共培养并非必需;对3000多个转化子通过固体平板、液体培养、感染昆虫等方法筛选突变子,筛选到菌丝生长受阻以及毒力降低相关的转化子,通过三代基因组重测序获得相关基因。ATMT转化系统为粉棒束孢功能基因的发现和特征描述提供了有用的工具。
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