【摘 要】
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褐藻多酚是羊栖菜中含量较高的一类具有生物活性的天然产物,从结构角度分析,尽管结构种类多样,但其仅由间苯三酚单体聚合而成。对长囊水云的研究表明,聚酮合酶基因是该单体生
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褐藻多酚是羊栖菜中含量较高的一类具有生物活性的天然产物,从结构角度分析,尽管结构种类多样,但其仅由间苯三酚单体聚合而成。对长囊水云的研究表明,聚酮合酶基因是该单体生物合成途径中的关键基因。同源搜索结果发现,羊栖菜中存在一个聚酮合酶基因,与前者具有极高同源性;除此之外,羊栖菜中还存在着另外两个聚酮合酶基因,但目前对它们的功能还不甚了解。本文从羊栖菜聚酮合酶的基因克隆、异源表达和酶学性质分析三方面进行探究:羊栖菜中存在3个聚酮合酶基因,分别是SfPKS1、SfPKS2和SfPKS3,克隆这三个基因后在大肠杆菌中进行了异源表达,并对纯化后的重组蛋白进行了酶学性质的研究。同源性分析羊栖菜的三个PKS基因表明:SfPKS2和SfPKS3具有较高的相似度,且与宾得马尾藻SbPKS和水云EsiPKS1具有较高同源性;同时,SfPKS1、2和3的底物识别位点和催化活性位点的氨基酸序列高度保守。SfPKS的催化底物测试了两种类型的CoA—直链烷基CoA和芳香类CoA,结果显示SfPKS能以芳香类CoA作为反应底物合成相应的产物。对羊栖菜PKS的研究有助于进一步挖掘羊栖菜中其他聚酮类化合物,为羊栖菜相关天然产物的深入研究和开发利用奠定基础。
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