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目的:研究术后疲劳综合征大鼠中枢能量、氧化应激、神经递质及神经元超微结构的变化特点,并探讨人参皂苷Rb1抗疲劳的中枢机制。
方法:本研究选择SPF级Sprague-Dawley大鼠作为实验动物,模型建立采用70%中段小肠切除端端吻合术法,术前三天通过抓力测试筛选出144只体重均匀大鼠进入实验。总的分为疲劳评估组和指标检测组,其中随即选取24只大鼠进入疲劳评估组,分为对照组、模型组和GRb1组(人参皂苷Rb1干预组),n=8;剩余120只用于指标检测,随机分为三大组:对照组、模型组和GRb1组(人参皂苷Rb1干预组),每大组再根据不同时间点分为术后第1天、术后第3天、术后第7天、术后第10天4小组,共12小组,每小组n=10,其中随机选择两只进行电镜取材观察。模型组和GRb1组按上述手术方法造模,对照组进腹后仅翻动小肠后关腹。术前1小时及术后每天,对照组和模型组按10 ml/kg体重剂量腹腔注射一次生理盐水,GRb1组按同样剂量腹腔注射一次人参皂苷Rb1。疲劳评估组大鼠术后第2-7天进行水迷宫实验,第1、3、7、10天检测大鼠最大抓力。指标检测组大鼠术后第1、3、7、10天取脑组织标本,用比色法检测中枢糖原和乳酸、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,用高效液相色谱-荧光检测器检测脑组织(海马)中的单胺类神经递质(5-HT、DA)含量,以及应用透射电镜观察中枢神经元超微结构变化。
结果:
1.疲劳评估指标:模型组与对照组相比,最大抓力明显下降(第3、7、10天,P<0.05)。水迷宫实验结果,模型组与对照组相比,总平均逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少。人参皂苷Rb1干预后,上述行为学指标得到明显改善。
2.能量相关指标:模型组较对照组相比,大脑糖原含量在术后第1、3、7天明显下降,术后第十天仍低于对照组水平。GRb1组较模型组相比,糖原含量均有升高趋势,其中术后第7天明显升高。三组间乳酸含量无明显差别。
3.氧化应激相关指标:模型组较对照组相比,MDA含量和SOD活性在术后第1、3天明显升高,GSH-PX活性在术后第7天明显升高。人参皂苷Rb1干预后,GRb1组与模型组相比,术后第3天MDA含量明显下降,SOD活性在术后第3、7天明显升高、GSH-PX活性在术后第7天明显升高。
4.神经递质含量:模型组较对照组相比,海马5-HT含量在术后第1、3天明显升高,至术后第10天逐渐恢复至对照组水平。GRb1组5-HT含量在术后第1、3天较对照组比有升高,较模型组相比均有下降趋势,其中术后第3天明显降低。三组间DA含量无明显差异。
5.超微结构:电镜结果显示,模型组神经元超微结构较对照组相比有一定程度损伤,以术后3天组最为明显,GRb1组神经元超微结构得到改善。
结论:术后疲劳综合征的中枢发病机制可能与术后一定时间内中枢能量物质缺乏,氧化应激损伤及中枢神经元结构和功能紊乱有关,人参皂苷Rb1可以增加能量供给,减弱氧化应激损伤,改善神经元结构和功能,这可能是其抗术后疲劳的中枢机制。