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多数研究报道,有机硒-硒代蛋氨酸(SM)在提高动物抗氧化功能方面优于无机硒-亚硒酸钠(SS)。通常情况下,硒的抗氧化功能主要通过硒蛋白来发挥,但我们的前期研究结果显示,SM与SS对抗氧化硒蛋白基因表达的影响并无显著差异。为此,本课题以肉鸡作为研究对象,通过测定细胞抗氧化反应中的关键转录因子Nrf2的基因表达和蛋白定位,探讨SM和SS是否可以通过调控Nrf2,激活Nrf2-ARE信号通路,诱导下游抗氧化基因的表达而发挥作用,旨在探明SM优于SS的抗氧化机制,为SM的产业化及其应用提供理论依据。 选择1d健康岭南黄羽肉鸡1080只,随机分成6组(每组含3重复,每重复60只)。试验采取2×3因子试验设计,6个试验组设计如下:①对照组(基础日粮,含0.04mg Se/kg),②SS组(基础日粮+0.15mg Se/kg),③SM组(基础日粮+0.15mg Se/kg),④对照+NaF组(基础日粮+800mg F/kg),⑤SS++NaF组(SS组+800mg F/kg),⑥SM++NaF组(SM组+800mg F/kg)。试验肉鸡垫料平养,自由采食和饮水,常规免疫程序,试验为期50d。饲养试验结束后,每个重复选取大小相似的公鸡4只,共计72只,屠宰取样并保存,测定其生理生化和细胞分子生物学等指标。 主要研究结果如下: 1.生长性能和饲料利用:日粮加硒显著(P<0.05)提高了肉鸡的生产性能;加氟则反之(P<0.05),在此基础上补硒具有明显的(P<0.05)改善作用;同比SM优于SS(P<0.05)。 2.细胞超微结构:日粮加硒不影响细胞的内部结构,加氟则损伤了肝、肾细胞内线粒体、内质网和细胞核的形态结构;但在加氟的基础上补硒减轻了氟对细胞结构的损害程度。 3.氧化损伤指标:日粮加硒显著(P<0.05)降低了血清和肝、肾组织中活性氧、丙二醛、羰基、8-羟基-2脱氧鸟苷的含量;加氟反之(P<0.05),同时补硒显著(P<0.05)降低了氟对细胞的氧化损伤;不同硒源的对比显示,SM的效果优于SS(P<0.05)。 4.抗氧化指标:日粮加硒显著(P<0.05)增强而加氟显著(P<0.05)降低了血清和肝、肾组织中抗氧化酶和二相解毒酶的活力,在加氟基础上补硒具有显著(P<0.05)的改善作用;此外,SM在提高机体抗氧化能力方面优于SS(P<0.05)。 5.细胞凋亡因子:日粮加硒显著(P<0.05)增高了血清和肝、肾组织细胞中Bcl-2含量,降低了凋亡蛋白酶-3的活力,加氟反之(P<0.05);但补硒显著(P<0.05)改善了氟的不良作用。不同硒源的比较结果显示,SM的效果优于SS。 6.Nrf2蛋白水平:日粮加硒或加氟皆提高了肉鸡肝、肾细胞中Nrf2的基因表达,增加了细胞核中Nrf2的含量;加氟同时补硒使Nrf2蛋白水平进一步增高(P<0.05),但两者之间无交互作用。同比SS,SM显著(P<0.05)提高了肝、肾细胞中Nrf2的水平。 以上结果提示:SM优于SS上调细胞Nrf2的基因表达,激活Nrf2-ARE信号通路,增强抗氧化酶和二相解毒酶的活力,提高机体的抗氧化能力,降低氟诱导的氧化应激对细胞结构及生物大分子的损伤作用,而达到改善肉鸡生长性能和饲料利用的功效。