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一、背景胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率局恶性肿瘤第二位,中国大中城市居第二位,农村为第一位。全国每年死于胃癌者约16万人,占癌症死亡人数的23%。中国胃癌防止现状可归纳为“一低三高”的特点:发病率及死亡率高,早期诊断率低(Ⅰ期仅占10%左右),手术切除率低(根治术切除率50%~60%),5年生产率低(各期总体生产率30%左右)。外科手术治疗目前仍是胃癌治愈的唯一方法,D2标准根治术已被国内外大多数学者认同,并已被USNCCN(the US NationalComprehensive Cancer Network)推荐,但从文献报告看,尽管对Ⅲ期胃癌患者施以D2或D2+甚至D3、D4根治术,5年生产率仍不及30%,单纯提高手术切除技术难以提高生产率,因此围手术期的局部非手术综合治疗日益受到重视。胃癌腹腔内转移复发最为常见,是影响胃患者术后5年生产率的主要因素,术后腹腔转移率42.5%~61.5%,因腹腔转移致死者70%,腹腔转移包括腹膜种植转移、腹腔淋巴转移及肝转移,其中最为主要的腹膜种植转移。种植转移的因素包括肿瘤细胞浸润浆膜脱落、术中操作挤压病灶脱落、术中离断标本和脉管时带有肿瘤细胞的消化液、淋巴液或血液溢入腹腔等等,因此,术毕后对腹腔进行有效的冲洗,对防止遗留肿瘤细胞种植转移有重要作用。二、研究目的本实验分为两个部分,通过两个部分的实验探索术尔泰对胃癌细胞是否具有杀伤作用,能否抑制胃癌细胞脱落腹膜转移。(一)体外实验部分:对比术尔泰和生理盐水浸泡同一细胞株胃癌细胞后胃癌细胞的存活状况,同时比较术尔泰浸泡不同时间后胃癌细胞的存活状况;通过实验明确体外环境下术尔泰对胃癌细胞是否有杀伤作用。(二)人体实验部分:分析比较胃癌D2手术术毕应用术尔泰冲洗腹腔与应用生理盐水冲洗腹腔对腹腔脱落细胞清除效果的疗效差异,通过实验明确体内环境下术尔泰对胃癌细胞腹膜种植转移是否有抑制作用。三、研究方法(一)体外实验部分为了研究术尔泰在体外环境中对胃癌细胞是否具有杀伤作用,我们采取体外培养胃癌细胞株(SGC-7901),然后采用同一胃癌细胞株分别浸泡于生理盐水和术尔泰溶液中15分钟,共分为2组(生理盐水对照组、术尔泰溶液实验组)。浸泡结束后,采用DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)染色法观察胃癌细胞凋亡情况。(二)人体实验部分为了研究术尔泰在体内环境,特别是对术后病人腹腔脱落胃癌细胞是否有杀伤作用,我们进行如下实验。采用随机对照分组原则,将病人分为2组(生理盐水对照组、术尔泰实验组)。实验组术毕后应用500ml术尔泰冲洗腹腔,对照组应用500ml生理盐水冲洗腹腔,比较两组患者术前腹腔脱落细胞阳性率、术后腹腔脱落细胞阳性率、术前阳性患者术后脱落细胞学检查转阴率、术后病理结果分期构成比。四、结果(一)体外实验部分:SGC-7901胃癌细胞株分别使用生理盐水和术尔泰溶液浸泡15分钟后,使用DAPI染色观察胃癌细胞凋亡情况发现:术尔泰溶液浸泡组可明显促进胃癌细胞凋亡。同时,对术尔泰浸泡实验组不同时间(5分钟、10分钟、15分钟)观察后发现,胃癌细胞凋亡数量虽浸泡时间增加而增多。(二)人体实验部分:通过随机分组原则,将200名胃癌病人随机分为两组,实验组100例患者中,术前腹腔脱落细胞阳性27例(阳性率27%),术后腹腔脱落细胞阳性8例(阳性率8%),术前阳性患者术后复查转阴19例(占术前阳性患者70.4%),术后切除标本病理分型(根据AJCC第7版)I期9例、Ⅱ期46例、Ⅲ期45例、Ⅳ期0例。对照组100例患者中,术前腹腔脱落细胞阳性26例(阳性率26%),术后腹腔脱落细胞阳性21例(阳性率21%),术前阳性患者术后复查转阴5例(占术前阳性患者19.2%),术后切除标本病理分型I期12例、Ⅱ期47例、Ⅲ期41例、Ⅳ期0例。两组患者术前腹腔脱落细胞阳性率差异不具有统计意义(P=0.873>0.05);术后腹腔脱落细胞阳性率差异具有统计学意义(P=0.009<0.05);术后脱落细胞转阴率差异具有统计学意义(P=0.001<0.05);两组患者术后病理分期构成比不具有统计学意义(P=0.731>0.05)。五、结论(一)体外实验部分:应用术尔泰溶液浸泡15分钟相比生理盐水浸泡15分钟,可明显促进胃癌细胞凋亡。对比术尔泰溶液浸泡胃癌细胞5分钟、10分钟、15分钟细胞凋亡情况发现,术尔泰浸泡时间增加可促进胃癌细胞凋亡。(二)人体实验部分:术后应用术尔泰行腹腔冲洗可降低术后胃癌细胞腹腔转移可能,同时减少术后腹腔粘连,降低胃癌术后复发可能,提高患者术后生存时间。