有氧运动对慢性间歇缺氧小鼠肺损伤及内质网应激的影响研究

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阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)是指睡眠时反复发生的间歇缺氧(CIH)/复氧,上气道阻塞,引起呼吸暂停或通气不足,从而使多器官功能受损,对患者的健康以及社会的经济带来较大危害。经研究发现运动对于OSAHS的患者的多器官功能损伤特别是肺功能有明显的保护作用,但其具体的机制尚不明确。目的:探讨有氧运动对CIH小鼠肺损伤及内质网应激的影响。方法:本实验选用的是雄性6周龄C57BL/6小鼠,体重为20-25g,总共40只。将小鼠随机分为4组:对照组(C组),运动对照组(E组),间歇缺氧组(H组),间歇缺氧+运动组(HE组),每组10只。采用自行设计电子计算机控制的慢性间歇缺氧装置进行CIH的造模。C组正常饲养5周。E组在常氧条件下,进行适应性跑台运动1周,从第2周开始每天进行60 min的跑台运动,适应性与正式运动共5周。H组进行间歇缺氧的处理8h/d,共5周。HE组第1周每天进行CIH处理后进行适应性跑台运动,从第2周开始,每天8小时的CIH处理后,进行跑台运动60分钟,适应性与正式运动共5周。实验结束后,采用苏木素-伊红染色方法观察肺组织的形态结构,Masson染色法观察肺组织纤维化程度。RT-PCR检测肺纤维化相关基因转化生长因子(TGFβ-1),I型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)及细胞凋亡相关基因CHOP的mRNA表达水平。Western-Blotting检测内质网应激的调控蛋白eIF2α的磷酸化水平和ATF4的表达水平。结果:(1)各组小鼠的形态学检查结果显示,CIH使小鼠肺组织水肿、结构紊乱,部分的肺泡融合成较大的含气囊腔,肺间质和血管周边有大量胶原纤维,纤维化程度严重。有氧运动使HE组肺泡破坏和纤维化现象明显好转。(2)与C组相比,H组的肺纤维化相关因子TGF-β1的mRNA表达水平明显升高(P<0.01),有氧运动使HE组的TGF-β1的mRNA表达水平明显低于H组(P<0.05)。同样,CollagenI的mRNA表达水平明显高于C组(P<0.05),HE组的CollagenI的mRNA表达水平与H组相比有明显降低(P<0.05)。(3)与C组相比,H组的内质网应激相关基因CHOP的mRNA的表达水平明显上升(P<0.05)。运动使HE组的CHOP的表达水平比H组明显降低(P<0.05)。Western Blot结果显示,与C组相比,H组的内质网应激调控因子eIF2α的磷酸化水平显著升高(P<0.01),HE组的p-eIF2α的表达水平与H组相比有明显下降(P<0.05)。同样,H组的内质网应激相关因子ATF4的蛋白表达与C组相比显著升高(P<0.01),运动使HE组ATF4的蛋白表达水平较H组显著下降(P<0.01)。结论:(1)有氧运动对慢性间歇缺氧的小鼠的肺损伤具有保护作用。(2)有氧运动通过改善CIH小鼠肺组织的内质网应激程度,减轻肺纤维化及凋亡程度,保护肺功能。在这个过程中,eIF2α、ATF4可能起着重要的调控作用。
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