雌激素替代治疗对中年卵巢切除大鼠大脑白质及海马内髓鞘及Lingo-1蛋白的影响

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由于雌激素的缺乏,绝经后妇女认知功能下降的进程明显加快。动物实验和临床研究已经证实雌激素替代治疗(estrogen replacement therapy,ERT)可以改善绝经后卵巢切除后大鼠和绝经后女性的认知能力,但其机制尚不明确。髓鞘结构的异常导致的神经纤维传导速度下降是大脑认知功能下降的重要原因之一。体视学研究发现一个月的ERT对卵巢切除大鼠的髓鞘具有保护作用。而富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白结构域的Nogo受体作用蛋白-1(Leucine-rich repeat and Ig domain containing NOGO receptor interacting protein-1,Lingo-1)在抑制髓鞘形成中发挥着重要的作用,提示Lingo-1可能参与雌激素保护大脑髓鞘结构和认知功能的过程。目的:检测经短期雌激素替代治疗(Estrogen replacement therapy,ERT)后中年卵巢切除大鼠大脑白质及海马内髓鞘相关的指标以及Lingo-1的表达情况,探讨雌激素对髓鞘作用的可能机制。方法1.随机选取24只中年(9~12月龄)雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术(Ovariectomized,OVX),恢复1个月后,随机分为安慰剂治疗组(OVX+Veh组,n=12)和雌激素替代治疗组(OVX+E组,n=12)。OVX+E组大鼠给予持续1个月的17β-estradiol颈背部皮下注射,OVX+Veh组大鼠给予持续1个月的芝麻油颈背部皮下注射。分别检测在术后及ERT后的血清雌激素水平。2.雌激素替代治疗1个月后,运用Morris水迷宫检测OVX+Veh组大鼠与OVX+E组大鼠的空间学习、记忆能力。3.随后每组大鼠随机选取5只,运用透射电子显微镜观察两组大鼠大脑白质及海马内髓鞘的超微结构,运用免疫组化方法检测Lingo-1在大脑白质及海马的分布情况。4.最后每组再随机选取5只大鼠,运用Western blot检测两组大鼠大脑白质及海马区域内髓磷脂碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)及Lingo-1的蛋白表达水平。结果:1.一个月的ERT后,OVX+E组大鼠血清雌激素水平显著高于卵巢切除术后大鼠的血清雌激素水平和安慰剂治疗后OVX+Veh组大鼠的血清雌激素水平(P<0.05)。且卵巢切除术后大鼠的血清雌激素水平和安慰剂治疗后OVX+Veh组大鼠的血清雌激素水平之间没有显著性差异(P>0.05)。2.在第1天的可见平台实验中,两组大鼠的寻台潜伏期无统计学差异(P>0.05)。在第2-5天的定位航行实验中,OVX+E组大鼠的逃避潜伏期明显短于OVX+Veh组(P<0.05)。在第6天的空间探索实验中,两组大鼠的游泳速度、目标象限游泳时间和目标象限游泳路程百分比均无统计学差异(P>0.05)。3.透射电镜结果显示,OVX+Veh组大鼠大脑白质、海马存在显著的髓鞘变性,而OVX+E组大鼠大脑白质及海马内的髓鞘结构完整且致密。4.Western blot检测结果显示:OVX+E组大鼠大脑白质、海马中MBP的含量均显著高于OVX+Veh组(P<0.05)。免疫组化结果显示,与OVX+Veh组相比,OVX+E组大鼠大脑白质及海马内的Lingo-1的分布均明显减少5.Western blot和免疫组化检测结果显示:OVX+E组大鼠大脑白质、海马中Lingo-1的含量及分布均显著低于OVX+Veh组(P<0.05)。结论:为期1个月的雌激素替代治疗对中年卵巢切除大鼠的认知功能及大脑白质、海马内的髓鞘确实具有明显的保护作用,而这种保护作用可能与雌激素下调大鼠大脑白质、海马内Lingo-1蛋白的表达有关。
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