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目的:Ezrin蛋白,是ERM(Ezrin,Radixin和Moesin)家族的一个成员,作为连接细胞膜与细胞骨架的桥梁,在细胞形态学、细胞骨架、细胞重构、粘附、侵袭和转移中发挥重要的作用。多个研究显示在骨肉瘤、前列腺癌和结直肠癌中,Ezrin蛋白的表达与肿瘤的侵袭性、转移潜能及不良生存存在明显正相关。我们前期实验初步显示鼻咽癌组织存在Ezrin蛋白表达,并且 Ezrin蛋白阴性表达和强表达病人的总生存差异存在统计学意义。但因前期实验的病例数较少和随访时间较短,并且在所得结果中,不同Ezrin蛋白阳性表达水平之间总生存差异不具有统计学意义。本实验将在前期研究的基础上增加病例数和延长随访时间,进一步探索Ezrin蛋白不同表达水平与鼻咽癌的临床病理因素、无进展时间和总生存时间之间的关系,以及Ezrin蛋白在鼻咽癌中的预后意义,最终目的是希望能够根据Ezrin蛋白表达水平将鼻咽癌患者分为不同危险亚组,建立危险分层的个体化治疗。
方法:⑴病人入选标准为:年龄大于18岁;经活检病理证实为鼻咽癌;临床分期为Ⅱ至ⅣB期;既往未接受过放化疗;具有完整的随访记录;完整记录有本实验所需的临床病理因素,如性别、年龄、TNM分期、血浆VCA-IgA、EA-IgA、EBN-Ab滴度、疾病出现复发或转移的部位和时间、出现死亡的时间和病因。中山大学肿瘤防治中心1999年1月至2001年3月收治的鼻咽癌病人中,收集符合入选标准病例200例,随访至2009年3月,记录病人的性别、年龄、T分期、N分期、TNM分期、血浆VCA-IgA、EA-IgA、EBN-Ab滴度、无进展时间和平均生存时间等。⑵利用免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织中Ezrin蛋白的表达水平;淋巴细胞的Ezrin蛋白表达强度作为鼻咽癌细胞强阳性表达的参照物,与淋巴细胞表达强度相近的为强阳性(+++);不同于背景细胞表达强度的为弱阳性(+);介于强阳性(+++)与弱阳性(+)之间为中度阳性(++);完全没有Ezrin蛋白表达的为阴性(-)。⑶采用SPSS16.0版本统计软件,x2检验方法用于不同Ezrin蛋白表达水平之间转移率的比较。Spearman秩等级相关及x2检验方法用于Ezrin蛋白与临床病理因素之间的相关性分析;Kaplan-Meier检验方法用于不同Ezrin蛋白表达水平之间的无进展时间和总生存时间的比较及生存曲线的制作;多变量Cox比例风险回归分析方法用于检验Ezrin蛋白表达水平、年龄、TNM分期与无进展时间、总生存时间的关系。在所有检验中,p<0.05认为具有统计学意义。
结果:200例鼻咽癌病人中,Ezrin蛋白表达阴性、弱阳性、中等阳性及强阳性分别是10例(5%)、56例(28%)、62例(31%)和72例(36%);Ezrin蛋白的表达程度与病人初诊时的性别、年龄、T分期、TNM分期、血浆VCA-IgA、EA-IgA、和EBN-Ab滴度不存在相关性,但与N分期存在明显正相关(p=0.032)。在Ezrin蛋白表达阴性-弱阳性、中度阳性及强阳性组等3个组中,转移率分别为57.6%、70.9%和83.3%,三组之间的差异具有统计学意义(p<0.004);平均无进展时间分别是85.5个月、63.2个月和54.6个月,而平均生存时间分别是100.7个月、80.8个月及70.6个月,在这3个亚组的无进展时间和平均生存时间之间的差异均存在统计学意义(P<0.001)。Cox比例风险回归分析显示Ezrin蛋白表达水平对鼻咽癌平均无进展时间和平均生存时间具有预测意义。
结论:本回顾性研究证实Ezrin蛋白在绝大多数鼻咽癌中表达;Ezrin蛋白的过度表达不仅促使鼻咽癌转移,也可能预测鼻咽癌不良预后。Ezrin蛋白的表达在预测鼻咽癌生物学行为方面提供了临床重要的信息;Ezrin蛋白可能是建立鼻咽癌危险分层治疗的有效指标。