苦参碱通过VEGFA-ERK1/2通路诱导人鼻咽癌细胞凋亡的机制研究

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背景和目的:目前,鼻咽癌的主要的治疗手段是放疗为主结合化疗的综合治疗。但放化疗的毒副作用较大,甚至影响治疗进程。因此,寻找新的抗肿瘤策略已成为当今研究的热点。近年来,研究发现苦参碱能有效抑制肿瘤细胞增殖生长和诱导肿瘤细胞凋亡,备受关注。本实验主要是通过体外实验研究苦参碱是否是通过VEGFA-ERK1/2MAPK通路抑制鼻咽癌细胞的增殖生长和诱导其凋亡,并探讨苦参碱的抗肿瘤机制。方法:MTT法检测苦参碱抑制鼻咽癌细胞和人脐静脉内皮细胞的生长的情况,Hoechest33258细胞核染色法和流式细胞仪检测苦参碱作用后鼻咽癌细胞的凋亡情况,实时荧光定量PCR检测Caspase-3基因的表达,Westernblot测定VEGFA、ERK1/2、p-ERK1/2、Caspase-3、 Caspase-8、 Caspase-9等蛋白表达。结果:MTT结果显示苦参碱能有效抑制鼻咽癌CNE1和CNE2细胞的生长,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05),而在有效抑制鼻咽癌细胞生长的浓度下却对人脐静脉内皮细胞无明显的抑制作用。Hoechest33258和流式细胞仪检测的结果显示苦参碱是通过诱导细胞的凋亡来抑制鼻咽癌细胞生长。实时荧光定量PCR技术检测结果显示Caspase-3基因的表达随苦参碱浓度的变大而上调。Western blot结果显示VEGFA随苦参碱浓度的增大而表达下调、ERK1/2随苦参碱浓度的增大其磷酸化下调,而Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9等凋亡相关蛋白表达随苦参碱浓度的增加而表达上调。结论:苦参碱能有效抑制人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞的增殖生长和诱导其凋亡,其机制可能是通过VEGFA-ERK1/2MAPK-Caspase细胞凋亡途径有关。
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