【摘 要】
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目的:通过对肾间质纤维化模型小鼠的特异性肾小管上皮细胞间质转分化相关指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)变化水平的测定,以评价药物灯盏花素是否对肾
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目的:通过对肾间质纤维化模型小鼠的特异性肾小管上皮细胞间质转分化相关指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)变化水平的测定,以评价药物灯盏花素是否对肾间质纤维化过程存在抑制作用?方法:选择4周龄雄性CD1小鼠72只作为研究对象,采用随机数字法均分为假手术组?单侧输尿管梗阻的肾间质纤维化小鼠模型组?灯盏花素组,每组小鼠共24只?其中灯盏花素组在于手术前1d至处死当天给予灯盏花素注射液腹腔注射(2.5ml/次,2次/d)?而假手术组及肾间质纤维化组小鼠均在同期腹腔注射同体积生理盐水?术后4?7?14d各组分别断尾取小鼠血液,处死8只小鼠,将左侧肾脏取出,横切作两个组分,以制作肾脏切片和免疫组化测试和液氮速冻中以为Western blot检测做准备?收集各组小鼠肾组织观察各组肾脏组织病理改变;以测定血肌酐及尿素氮水平在各组小鼠中的不同水平;采用免疫组化及Western blot方法检测α-SMA?E-Cad的蛋白在肾脏的表达?结果:在三组小鼠的血肌酐及尿素氮水平的测量结果中,模型组的小鼠相较假手术组,BUN和Scr水平均呈明显升高趋势,差异显著有统计学意义(p<0.05)。同一时刻的灯盏花素组小鼠模型组相比,BUN和Scr水平降低明显,差异显著有统计学意义(p<0.05)?术后14d,灯盏花素组和模型组的小鼠,镜下见肾小管间质病变进行性发展,炎性细胞在肾间质周围广泛可见,管腔有不同程度增粗,纤维结缔组织显著蓝染?比较各组间的肾间质相对面积,提示在7d至14d间灯盏花素组的肾间质相对面积与同期的模型组相比,有明显的下降趋势,差异显著有统计学意义(p<0.05)。免疫组化及Westernblot检测结果提示,灯盏花素组在术后4?7?14d的α-SMA表达与同时间点的模型组相比,水平有明显的下降(p<0.05)。模型组术后4d可见E-Cad表达明显降低,并随梗阻后时间的延长而显著降低;灯盏花素组术后4?7?14d的E-Cad A表达均显著高于同时间点的模型组(p<0.05)?结论:灯盏花素具有抗肾小管上皮间质转分化的作用;灯盏花素可通过下调α-SMA、升高E-Cad,进而减轻肾间质纤维化,延缓小鼠肾衰进展;灯盏花素可通过抑制肾小管间质转分化(EMT)的过程,进而抑制肾间质纤维化。
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