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本论文研究内容是水牛FSHR基因和表达检测体系的建立。论文共分为两部分：第一部分为文献综述部分；第二部分，包括第一章和第二章，为试验研究部分。第一章研究目的是通过对水牛FSHR基因的克隆、序列分析，为进一步研究FSHR基因的作用机理和设计特异于水牛FSHR基因的半定量检测引物打下基础。根据荷斯坦牛FSHR基因设计引物，分别以水牛血液DNA和卵巢组织总RNA为模板，通过聚合酶链式反应(PCR)、反向聚合酶链式反应(RT-PCR)从水牛血液DNA和卵巢的mRNA中扩增出相应的DNA和cDNA片段。该扩增片段经纯化后，连接到pMD18-T载体上扩增测序。测序后分析表明，该基因5’启动子区(Promoter)长度为967 bp，cDNA全长2229bp，其中1～64 bp为5’侧翼序列(UTR)，2153～2229 bp为3’侧翼序列(UTR)，65～2152 bp为FSHR的读码框(ORF)，1457～2152 bp为FSHR的第10外显子。BLAST比对显示，与牛属动物的同源性为98％，与羊属97％，具有高度的进化保守性。使用ClustalX对水牛FSHR基因外显子区域做多重比对分析后，构建部分哺乳动物系统进化树，与实际进化关系保持很好的一致。使用TMHMM Server v．2.0对包括编码FSHR678个氨基酸和N’端17个氨基酸信号肽的全部序列(起始密码子为通用密码子ATG，终止密码子为TAA)进行分析，该受体胞外域、跨膜域和胞内域三部分的大小分别为349、264和65个氨基酸。第二章是根据第一章中水牛FSHR基因前半段序列设计特异于水牛的鉴定引物，根据猪、水牛基因设计内参引物β-action，采用半定量检测法比较和分析在不同组织、不同卵泡类型、不同质量的COCs颗粒细胞上卵泡刺激素受体mRNA(FSHR mRNA)的表达差异，以及COCs培养过程中卵泡FSHR mRNA的动态变化。结果显示，1)在卵巢、睾丸中FSHR基因有表达，而其他检测的组织中没有表达；2)不同直径大小卵泡之间的COCs颗粒细胞上FSHR mRNA相对表达量有差异，大卵泡的COCs与中、小卵泡COCs之间差异显著，中、小卵泡COCs之间无显著差异，小卵泡的表达强于大卵泡；3)A、B、C三类COCs颗粒细胞上FSHR mRNA相对表达量有差异，A、B类COCs之间及B、C类COCs之间有显著差异，A类COCs显著高于C类COCs；4)在体外培养的0h、6h、12h、18h、24h五个不同时段中，随着培养时间的延长，COCs颗粒细胞上FSHR mRNA的相对表达量呈递减趋势。