局部晚期非小细胞肺癌的治疗结果及预后相关microRNA研究

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第一部分:局部晚期非小细胞肺癌同步放化疗的治疗结果目的:评价局部晚期非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)患者同步放化疗的疗效和不良反应。方法:回顾性分析2001年1月至2010年12月间初治接受同步放化疗的251例局部晚期NSCLC患者的临床资料,其中IIIa期76例,IIIb期175例。放疗中位剂量为 60 Gy,其中调强放疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)174 例,三维适形放疗(three dimensional-conformal radiotherapy,3D-CRT)51 例,常规放疗 26例。全组患者接受EP方案(依托泊苷加顺铂)化疗112例,接受PC方案(紫杉醇加卡铂)化疗99例,接受拓扑替康单药化疗18例,接受其他方案化疗22例。分析同步放化疗的疗效及不良反应。结果:全组有244例患者可评价近期疗效,其中完全缓解(complete response,CR)6 例(2.5%),部分缓解(partial response,PR)183 例(75.0%),疾病稳定(stable disease,SD)42 例(17.2%),疾病进展(progressive disease,PD)13 例(5.3%)。全组患者中位随访时间62个月,中位生存时间为21个月,其1、3、5年生存率分别为69.2%、31.2%和23.2%。全组患者中位无进展生存时间为10个月,其1、3、5年无进展生存率分别为40.9%、22.1%和17.7%。Ⅲa期和Ⅲb期NSCLC患者的5年生存率分别为29.2%和20.7%,差异无统计学意义(p=0.133)。全组有244例患者可评价治疗失败模式,其中61例(25.0%)出现局部区域进展,55例(22.5%)出现远处转移,77例(31.6%)出现局部区域进展+远处转移。≥3级放射性肺炎、放射性食管炎及白细胞减少的发生率分别为4.4%、11.2%和26.7%。结论:局部晚期NSCLC同步放化疗的疗效较好,不良反应患者可耐受。同步放化疗是不可手术的局部晚期NSCLC的标准治疗。第二部分:局部晚期非小细胞肺癌同步放化疗后的巩固化疗结果分析目的:对于局部晚期非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)患者,同步放化疗后巩固化疗的作用尚存在争议。基于此,本研究旨在分析巩固化疗的疗效和毒性。方法:回顾性分析2001年1月至2010年12月在我院接受根治性同步放化疗的局部晚期NSCLC患者的病例资料。结果:203例患者中,113例(55.7%)接受了巩固化疗。中位巩固化疗周期数为3个,89.4%的患者完成了≥2周期的巩固化疗。巩固化疗组的总生存(overall survival,OS)显著优于非巩固化疗组(中位OS,27个月vs.16个月;5年OS,30.4%vs.22.5%;p=0.012)。巩固化疗组和非巩固化疗组的中位无进展生存(progression free survival,PFS)分别为12个月和9个月(p=0.291)。亚组分析显示男性(HR:0.63;95%Cl,0.44-0.90)、年龄<60 岁(HR:0.63;95%CI,0.42-0.95)、非鳞状细胞癌(HR:0.44;95%CI,0.25-0.76)、疗前卡氏评分≥80(HR:0.67;95%CI,0.48-0.93)、Ⅲb 期(HR:0.64;95%CI,0.43-0.95)、同步放化疗后疗效为稳定(stable disease,SD)(HR:0.31;95%CI,0.14-0.65)和放疗剂量≥60 Gy(HR:0.69;95%CI,0.48-1.00)的患者能够从巩固化疗中显著获益。毒性方面,巩固化疗组≥3级的血液学毒性发生率更高,但是两组差异没有达到统计学意义(45.1%vs.34.4%;p=0.123)。结论:同步放化疗的基础上加以巩固化疗可能能够进一步延长局部晚期NSCLC患者的生存而并没有增加治疗相关毒性,特别是对于男性、年龄<60岁、非鳞癌、疗前卡氏评分≥80、Ⅲb期、SD和放疗剂量≥60 Gy的患者。但该研究结果仍然需要大规模前瞻性研究的证实。第三部分:MicroRNA-29c靶向VEGFA抑制肺腺癌进展的机制研究目的:肺腺癌具有侵袭性强和预后异质性大的特点,目前其发生发展的机制尚未被阐明。越来越多的证据显示microRNAs(miRNAs)的异常调控与多种肿瘤的发生发展密切相关。本研究目的为寻找肺腺癌的预后相关miRNA并研究其影响肿瘤进展的机制。方法:对87例病理证实为IIIa-N2期肺腺癌的福尔马林固定石蜡包埋(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)标本进行miRNA芯片检测以寻找预后相关miRNA。采用脂质体转染法瞬时转染miR-29c过表达和干扰质粒,MTS实验检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞迁移/侵袭能力变化。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测和验证miR-29c与靶基因的关系,将miR-29c过表达和抑制后通过qRT-PCR、ELISA和Western blot检测靶基因mRNA、分泌蛋白和细胞内的蛋白变化。利用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)成管实验检测miRNA对血管生成的影响。通过免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)检测患者FFPE标本中miR-29c与微血管密度(microvessel density,MVD)和靶基因表达的相关性。结果:miRNA芯片及生存分析结果显示miR-29c表达下调与患者的不良预后显著相关。在体外实验中miR-29c抑制细胞增殖、迁移和侵袭。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验发现miR-29c能够直接结合血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的 3’-UTR 区域,qRT-PCR、ELISA 和 Western blot实验结果发现miR-29c能够在转录和翻译水平下调VEGFA的表达。体外实验中miR-29c能够抑制HUVEC成管。高表达VEGFA能够基本完全逆转miR-29c导致的细胞增殖、迁移/侵袭和血管生成能力下降。在患者FFPE标本中miR-29c与MVD和VEGFA的表达具有显著相关性。结论:miR-29c通过靶向VEGFA在肺腺癌的进展中发挥抑癌作用,miR-29c有望作为肺腺癌预后的分子标志物和有价值的药物作用靶点。
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