本实验制备了大量抗己烯雌酚(DES)的单克隆抗体；制备了抗DES单抗免疫亲和柱，并对柱效进行了鉴定和对亲和色谱条件进行了优化；将免疫亲和柱与高效液相色谱仪(HPLC)和气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)联用，建立了IAC-HPLC和IAC-GC-MS检测方法，为IAC柱的开发和应用奠定了基础。 　　通过培养细胞收集细胞上清和将细胞注射小鼠腹腔收集腹水两种方法获得大量单抗，并对其进行了纯化、鉴定。取15只健康的雌性Balb/c小鼠，腹腔注射杂交瘤细胞，7～10天后，取腹腔腹水，用辛酸-硫酸铵法纯化腹水抗体；采用无血清培养基培养细胞，收集处于对数生长期的细胞上清，经PEG20000浓缩后，用传统硫酸铵沉淀法纯化细胞上清抗体。间接ELISA方法分别检测纯化后腹水抗体的效价滴度为1：20000，上清效价滴度为1：8000，抗体的亲和常数为8.72×108。核酸蛋白仪测得腹水抗体浓度为1.01mg/mL，上清浓缩后抗体浓度为2.88mg/mL。采用SDS-PAGE电泳鉴定纯化后的细胞上清及腹水抗体，在SDS-PAGE变性电泳条件下单抗显示重链和轻链两条带。 　　通过溴化氰活化的琼脂糖凝胶载体与抗体偶联，制备了抗己烯雌酚的单抗免疫亲和(IAC)柱。将细胞上清和腹水抗体混合物的浓度调整为2.74mg/mL，单克隆抗体基本上被偶联到CNBr活化的Sepharose4B凝胶上，偶联率在75﹪～90﹪之间。测定了免疫吸附剂的性能，对亲和色谱条件进行了优化，选择了pH7.0的磷酸缓冲液作为吸附与平衡介质，4mL80﹪的甲醇溶液为洗脱剂，在自然重力下洗脱。制备的亲和柱柱床体积为1.6～1.8mL，柱容量在1μg左右。将60mL0.02μg/mLDES溶液和200mL0.006μg/mLDES溶液分别过IAC柱后，用4mL80﹪甲醇溶液洗脱，回收率在90﹪以上，说明IAC具有67倍的浓缩效率。交叉实验结果显示7B6抗体对己二烯雌酚、己烷雌酚有着显著交叉反应，交叉反应率分别为299.54﹪和111.36﹪，所以抗DES的单抗免疫亲和柱也可以作为DIEN、HEX的残留分析的工具。 　　将IAC柱与HPLC和GC-MS联用，对空白肌肉组织添加药物进行回收率实验。