支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia, BPD)是早产儿主要的死亡原因之一。BPD存活的患儿则多残留阻塞性气道疾病,肺动脉高压以及严重的生长发育迟滞。尽管近年来随着早产儿重症监护技术和肺表面活性物质的运用,早产儿存活率已显著提高,但BPD的发生率却有增无减。BPD发病率国内外文献报道相差很大,这主要与BPD诊断标准及缺乏大规模临床资料有关。目前研究认为氧中毒、气压伤、早产是BPD的明确病因,但仍有多种病因参与其中。因此,揭示其高危因素在临床判断、预防、治疗、估计预后等方面有重要意义。我们采集临床病史,揭示BPD发生的高危因素、发病趋势、预后,以指导临床治疗。严重的肺支气管发育不良,其主要病理改变为肺泡结构破坏和大小不一、肺实质纤维化并增厚、肺泡表面积减少和接近气道末端肺泡区域毛细血管的密度增加。该病治疗困难,且缺乏根本性治疗手段,探索其病理机制、寻找更好的治疗手段一直是亟待解决的难题。研究发现在BPD支气管肺泡灌洗液或肺组织中转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达明显升高。许多研究表明TGF-β1影响肺发育,同时也在不成熟肺高氧损伤纤维化发生发展过程中扮演十分重要的角色。因此TGF-β1成为现今高氧肺损伤研究的一大热点与重点。目前研究的报道多以动物为研究模型,本课题收集临床有高危因素的BPD患儿血清,及死亡后肺组织标本,以研究TGF-β1的变化,为分子治疗BPD提供依据。第一章支气管肺发育不良高危因素分析及预后目的探讨早产儿支气管肺发育不良(BPD)的发生率、趋势及危险因素,揭示BPD发生的高危因素。方法回顾性分析我院早产儿重症监护病房2007.1.1—2009.12.31三年度胎龄小于37周存活时间≥28天的早产儿共885例,其中发生BPD患儿161例,对其临床资料进行比较,对患儿的性别、胎龄、是否双胎或多胎、生产方式、出生体重、住院日、住院费用、住院期间合并疾病、呼吸机参数、机械通气时间、次数、nCPAP时间、用氧天数、入院时血气、血常规、血生化、产前激素、肺表面活性物质(PS)治疗与否、妊娠合并症及预后等进行分析比较,揭示出BPD发生的高危因素；对单因素分析有意义的因素作多自变量回归分析,揭示BPD发生的独立因素。计量资料以均数±标准差(x±s)；定量资料用t检验；计数资料采用x2检验；多因素分析采用Logistic回归分析,以α<0.05为显著性水准,所有数据用SPSS16.0统计软件包处理。结果1.BPD发生率在住院日≥28天患儿为18.2%(161／885)；总发生率为3.6%；2.BPD发生率在住院日≥28天患儿中发生率逐年下降(约4.1%／年),总发生率却在逐年升高(约0.6%／年)；3.单因素分析BPD发生的高危因素有性别(男)、出生胎龄(<30周)、生产方式(顺产)、多胎(≥3胎)、出生体重(<1400g)、NRDS、PDA、PPHN、肺出血、气胸、肺炎、颅内出血、心功能不全、败血症、呼吸暂停、贫血、HIE、高氧(≥40%)、机械通气时间(≥10天)、次数、nCPAP时间(≥10天)、PH值≤7.10、低白蛋白血症(≤30g／L)、窒息史等；4.多自变量logistic回归显示,出生胎龄、心功能不全、呼吸机使用时间及次数、nCPAP时间等因素可为BPD发生的独立因素,相关系数分别为1.128、0.996、(0.216、1.089、4.102)、(2.665、4.144)、4.004、3.790；OR值分别为3.089、2.708、1.242、2.972、60.469、14.370、63.031、44.273：5.产前激素不能降低BPD发生率；6.BPD发生率与妊娠期合并症无明显关系；7.BPD组伴早产儿视网膜病(ROP)、先天性白内障、脑积水、先心病、遗传代谢病、中枢神经系统感染等均高于非BPD组,放弃／死亡率明显高于非BPD组；BPD预后明显差于非BPD组。结论1.胎龄<30周是BPD发生的发病基础；2.BPD发生率逐年升高,产前因素对BPD发生无统计学意义；3.BPD治疗棘手,预后差,对有高危因素的早产儿,采取抗感染、减少呼吸机使用时间、预防心衰等综合防治措施。第二章BPD患儿TGF-β1表达变化的研究及意义目的：探讨BPD患儿血清及肺组织TGF-β1因子表达的变化,并阐述其意义。材料：选取2009年10月至2010年1月北京军区总医院早产NICU早产儿共65例。纳入标准：BPD组患儿胎龄小于37周,生后1周内有呼吸机辅助呼吸治疗史且上机时间≥15天,有高氧吸入史；对照组患儿胎龄小于37周,无呼吸机治疗史,无高氧吸入史。血清标本病例组收集有BPD倾向的患儿血液1.5ml,共34例,对照组病例31例；肺组织病例组共收集3例,对照组3例。肺组织采集为患儿死亡,经家属知情同意后取得。方法：血清收集：采集外周静脉血液后注入促凝管,室温静置30后1200rpm离心15min,取上清转移至高压消毒后1.5mlEP管,标记后-20℃冰箱保存备用；肺组织收集：患儿死亡后按部位各取材约1.5cm×1.5cm,存放于10%福尔马林,室温下保存备用。血清采用酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)方法检测TGF-β1浓度；肺组织采用HE染色、免疫组织化学、免疫荧光学方法检测TGF-β1水平。结果：1.血清中TGF-β1因子BPD组表达量(9819.1±5540.1)(pg／ml)明显高于对照组(5952.7±2666.0)(pg／ml),两组间有统计学差别(P=0.001)；2.肺组织免疫组化显示BPD组染色面积及强度大于对照组,IPP图像分析系统显示BPD组平均光密度(mean density)(0.245±0.152)高于对照组(0.116±0.073),两组间有统计学差别(P=0.042)；3.肺免疫荧光显示BPD组肺泡上皮细胞内表达TGF-β1荧光增多,密度增大,饱满；对照组荧光表达少,密度低,呈空泡状。结论：1.支气管肺发育不良患儿血清及肺组织TGF-β1因子表达增多,促进肺纤维化。