细胞自噬与卵巢上皮性癌顺铂耐药的相关性研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhanghongyingyxl
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目的本研究以卵巢癌顺铂敏感型细胞株SKOV3及其顺铂耐药型细胞株SKOV3/DDP为研究对象,以其作为体外化疗耐药的模型,探讨细胞自噬与上皮性卵巢癌顺铂耐药的关系。本研究通过分别检测上皮性卵巢癌顺铂敏感细胞与顺铂耐药细胞中自噬水平,并利用自噬体特异性抑制剂3-MA抑制细胞自噬体产生,观察细胞自噬活性与上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的相关性及抑制细胞自噬对上皮性卵巢癌顺铂敏感性的影响。方法本研究应用MTT法、MDC荧光染色法及激光共聚焦显微镜技术等方法,观察SKOV3、SKOV3/DDP细胞株的自噬现象;通过自噬特异性抑制剂3-MA作用,了解3-MA对卵巢癌细胞胞浆内自噬体的抑制作用,并探讨细胞自噬与卵巢癌顺铂敏感性的关系,以及抑制细胞自噬对卵巢癌顺铂敏感性的影响。结果1.SKOV3细胞株顺铂IC50值为3.330μg/ml,SKOV3/DDP细胞株顺铂IC50值为14.152μg/ml。2.3-MA联合顺铂作用后SKOV3细胞株的顺铂IC50值为3.312μg/ml,其对顺铂的敏感性无明显影响(P=0.221),SKOV3/DDP细胞株顺铂IC50值为6.386μg/ml,提示3-MA可提高上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞对顺铂的敏感性(P=0.000)。3-MA对SKOV3、SKOV3/DDP细胞株无细胞毒性作用。2.MDC荧光染色及激光共聚焦显微镜观察SKOV3、SKOV3/DDP细胞株胞浆自噬体的形成情况,顺铂能够诱导自噬体的生成,在3-MA作用下,SKOV3/DDP细胞株顺铂诱导的自噬体荧光强度变小,而SKOV3细胞株自噬体的荧光强度变化不大。提示3-MA通过抑制细胞自噬体的形成,增加了SKOV3/DDP细胞株的顺铂敏感性,细胞自噬活性增强与卵巢癌顺铂耐药有关。结论1.细胞自噬活性增强与上皮性卵巢癌顺铂耐药有关2.抑制细胞自噬活性可以部分逆转上皮性卵巢癌SKOV3/DDP顷铂耐药,但不改变顺铂敏感型细胞SKOV3对顺铂的敏感性。
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