研究背景不安腿综合征(restless legs syndrome,RLS),是一种感觉运动障碍疾病。其特征是身体部位,尤其是腿部,有不愉快的感觉,导致迫切需要移动四肢,从而缓解相关的不适,如感觉异常和感觉障碍。虽然RLS最常见的影响部位是腿部,但它也会影响身体的其他部位,如头部、躯干和手臂。这些症状发生在休息时,并在晚上强度增加,进而导致严重的睡眠中断和生活质量受损。虽然RLS的发病机制尚不明确,可能与遗传因素、缺铁和多巴胺(DA)能系统异常等具有相关性。维生素D为类癸二酸类的脂溶性激素,在日光下在皮肤中产生。在钙磷代谢中起关键作用。最近,人们对维生素D对炎症和免疫调节以及铁和多巴胺代谢的作用越来越感兴趣,在丘脑,下丘脑,黑质和大脑皮层中发现了维生素D受体,最近研究表明维生素D在不同神经系统疾病中可能起作用。维生素D被认为对乙酰胆碱、DA、5-HT和GABA合成的遗传调控具有积极的控制作用。而25-羟维生素D(25-OH-VD)可能会影响黑质纹状体DA能途径。在大鼠中的研究证实,25-OH-VD缺乏与皮层中多巴胺浓度的改变有关。25-OH-VD会提高多巴胺水平,并保护多巴胺能神经元。同样,25-OH-VD被证明会增加谷胱甘肽的水平,而谷胱甘肽水平降低亦可影响多巴胺能神经元活性。此外,Orme等观察到在培养基中添加1,25-二羟基维生素D后,大鼠DA能神经元的数量呈剂量依赖性增加,并得出结论25-OH-VD可能会增加DA能神经元数量的结论。因此,可推断25-OH-VD缺乏会导致多巴胺能系统功能障碍,最终导致RLS。然而,25-OH-VD在RLS中的作用还没有得到很好的研究。虽然已有一些关于25-羟维生素D和RLS之间的关系的研究,但研究结果参差不齐,以及主要为横断面研究或由涉及相对较小样本的病例组成。因此,需要进一步的治疗、随访研究明确RLS和25-OH-VD水平之间的联系。本课题旨在探究25-OH-VD水平与RLS发病的关系及维生素D对其的治疗作用。同时本课题通过完善RLS严重程度评定量表、HAMA、HAMD、PSQI进一步探究了 RLS和焦虑、抑郁及睡眠障碍的相关性。为RLS的诊断、治疗及管理提供帮助。研究目的1.探讨血清25-羟维生素D水平与RLS发病相关性;2.RLS患者症状严重程度与焦虑、抑郁状态及睡眠障碍之间的关系;3.维生素D在RLS中的治疗作用。材料和方法1 研究对象收集自2017年8月至2019年9月期间,5、6、7、8、9、10六个月份在山东大学第二医院就诊(有研究表明,春冬季节本身就容易引起维生素D缺乏,为了尽最大可能消除季节对试验结果的影响,因此仅收集以上6个月份就诊者),诊断明确且符合以下纳入与排除标准的RLS患者136例,包括男性52例,女性84例。因各种原因,23名患者未能完成随访,最终随访完成患者113例,其中男性43例,女性70例。收集同时期性别、年龄、高血压病史、吸烟、饮酒史相匹配的进行体检且经严格筛查后不具排除标准的非RLS者84例,包括男性30例,女性54例。所有入选者均来自久居在山东省的汉族人。2 纳入与排除标准2.1 纳入标准(1)本研究主要研究非家族性特发性RLS。(2)符合2014年IRLSSG提出的RLS诊断标准。(3)入院前除已知患有高血压病外,无其它已知慢性疾病。2.2 排除标准(1)入院前已有明确多发性神经病,糖尿病,肾衰竭,慢性肝衰竭,甲状腺激功能减低,帕金森病,骨质疏松以及各类精神类疾病。妊娠、酗酒(40克酒精/天)、BMI<18.5或>24或其它继发性RLS的已知原因,家族性RLS病史。(2)有皮质类固醇,雌激素,双膦酸盐,降钙素,钙或维生素D,抗精神病、镇静催眠药物治疗史。(3)目前正在服用已知可缓解RLS症状的药物。(4)入院后铁蛋白,血清铁,碱性磷酸酶(ALP),镁,血红蛋白(HGB),尿素,肌酐,钙,维生素B12,糖化血红蛋白Al,fT3,fT4和促甲状腺激素指标异常者。3 数据收集(1)记录人口学特征:性别、年龄、身高、体重;记录既往史、个人史、家族史;吸烟史、饮酒史。(2)所有被纳入者均完善血清25-OH-VD水平监测。另外RLS患者行国际不安腿综合症研究小组(IRLSSG)制定的RLS评定量表、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评测。4 分组及实验方法(1)首先将符合入组标准的136例确诊RLS患者作为实验组,84名非RLS组作为对照组。应用罗氏e602仪器电化学发光法检测符合纳入标准的RLS组和非RLS组所有个体血清25-OH-VD水平。对比分析血清25-OH-VD与RLS之间的关系。(2)由同一名经过培训合格的神经内科医师对RLS组所有个体完善RLS评定量表、HAMA、HAMD、PSQI评估。分析RLS症状的严重程度是否与血清25-OH-VD水平、焦虑、抑郁状态以及睡眠障碍存在相关性。(3)对所有入组的RLS患者每日给予800单位维生素D 口服(所服药物均为维生素D滴剂/星鲨),随访90天后23名患者因各种原因(包括不能配合规律服药、存在维生素D滴剂不良反应等原因)未能完成随访,最终随访完成患者113例,其中男性43例,女性70例。再次由同一医师复测上述量表及复查血清25-OH-VD,因患者来院复诊依从性差随访大多由电话或微信等形式进行,治疗后血清25-OH-VD水平样本量小,因此未对其进行统计分析。(4)再次将完成随访的113例患者作为实验组,该113例患者治疗前作为对照组,对治疗前后相关量表得分进行统计分析,评估维生素D治疗后对RLS症状改善效果。5 统计分析统计分析采用采用SPSS23.0软件,对于符合正态分布计量资料的用均数±标准差表示,采用配对t检验或独立t检验;对于性别、是否患病等资料采用频数及百分率表示,采用x2检验;运用多因素Logistic回归分析,计算优势比(odds ratio,OR)、95%置信区间(95%confidence interval,95%CI),应用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析血清25-OH-VD水平对RLS的诊断价值,通过计算Youden指数,得出最佳截断值。将α=0.05作为具有显著性水平的标准。结果(1)与非RLS健康对照组相比,治疗前RLS组血清25-OH-VD正常的比例更低:(27.4%vs9.6%);在血清25-OH-VD缺乏的情况下,即<30 ng/ml,发生RLS的风险高于 25-OH-VD 充足的情况:(OR 3.567,P<0.001,95%CI 1.692～7.523)。(2)与对照组相比(24.83±8.3ng/ml),RLS患者的平均血清25-OH-VD水平显着降低(17.82±7.83ng/ml)。(3)RLS评定量表评分(21.69±7.44)与血清25-OH-VD水平呈负相关(r=-0.222,P=0.009),即血清25-OH-VD水平越低,RLS症状越严重;RLS评定量表评分与HAMA评分(15.57±5.53)呈正相关(r=0.664,P<0.01),RLS评定量表评分与HAMD评分(12.71±6.20)呈正相关(r=0.494,P<0.01),RLS 评定量表评分与 PSQI(12.74±3.60)呈正相关(r=0.463,P<0.01),即RLS症状越严重,焦虑、抑郁以及睡眠问题越严重。(4)113例完成随访患者中RLS量表评分治疗前(22.09±7.75)与治疗后(19.37±6.82)相比,症状明显好转(P<0.001);汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分治疗前(15.47±5.28)与治疗后(14.95±5.79)相比,焦虑症状无明显好转(P>0.05);汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分治疗前(12.90±6.23)与治疗后(12.16±5.97)相比,抑郁症状有所缓解(P<0.05);匹斯堡睡眠指数(PSQI)治疗前(12.95±3.56)与治疗后(10.99±3.07),睡眠状况明显好转(P<0.001)。(5)通过对完成随访者RLS评定量表亚组得分发现:治疗前后症状严重性项目治疗后(5.89±3.00)与治疗前(6.80±3.36)相比以及睡眠方面项目治疗后(3.55±2.11)与治疗前(4.32±2.19)相比,均有明显改善(P<0.001);但发作频率项目治疗后(4.50±2.13)与治疗前(4.67±2.06)相比,情绪方面项目治疗后(4.50±2.13)与治疗前(4.67±2.06)相比,无明显改善(P>0.05)。(6)采用ROC曲线发现血清25-OH-VD水平预测RLS的发生曲线下面积为0.75;95%置信区间:(0.680,0.820)。计算Youden指数,得出最佳截断值19.50ng/ml,血清25-OH-VD水平能很好的预测RLS的发生,灵敏度76.20%,特异度68.10%。(7)本研究失访率约16.9%。通过对失访者与完成随访者相关基线资料做统计分析,我们发现差异无统计学意义,因此因失访不会对最终结果造成偏倚。结论(1)低血清25-OH-VD水平与RLS的发病存在相关性,其水平越低症状越严重且发病风险越高;(2)维生素D治疗RLS有效,可改善RLS患者症状严重程度以及睡眠问题,但对发作频率及焦虑状态未发现明显改善;(3)RLS的严重程度与焦虑、抑郁症状及睡眠问题呈正相关。