NDRG2在多种胰岛β细胞系的表达及其对胰岛素合成的影响

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:acb13202
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的NDRG2(N-Myc down-stream regulated gene)是N-Myc下游调节基因(NDRG)家族的重要成员之一,NDRG家族还包括NDRG1、NDRG3和NDRG4。目前研究发现该家族与细胞的增殖分化,应激反应及激素的代谢调节等方面相关。人源NDRG2是我校生化教研室首先发现并被命名的(AF159092)新基因,并被GenBank收录,人与小鼠NDRG2同源性高达95%。前期研究发现NDRG2在胰腺组织中主要分布于胰岛细胞的细胞质中,且与胰岛素的表达分布一致,为了验证NDRG2与胰岛素之间的关系,我们从细胞及动物水平进行了研究,从而进一步阐明其生物学功能和作用机制。方法①通过间接免疫荧光和免疫组织化学的方法明确Ndrg2在四种胰岛细胞系(MIN6、TC3、 TC6、INS-1)及小鼠胰腺组织中的分布与定位;②通过免疫印迹及RT-PCR的方法检测NDRG2在四种胰岛细胞系(MIN6、 TC3、 TC6、INS-1)中的表达;③通过RNAi的方法下调NDRG2后,观察INS-1,MIN6细胞中胰岛素mRNA的变化;④通过间接免疫荧光的方法观察siRNA下调NDRG2后,在MIN6细胞中NDRG2、PDX-1的表达与分布变化;结果①NDRG2与胰岛素共同分布在胰岛细胞胞质中。②NDRG2在四种胰岛细胞系中都有表达,其中在INS-1及MIN6细胞中表达相对较高。③在INS-1和MIN6细胞中,下调NDRG2,通过实时定量PCR检测胰岛素mRNA水平,发现NDRG2与胰岛素mRNA表达呈负相关。④在MIN6细胞中,下调NDRG2未能影响PDX-1的表达与活性,PDX-1的荧光强度和细胞定位没有明显变化。结论①NDRG2主要表达在胰岛细胞的胞质中,在四种胰岛细胞系及小鼠胰岛细胞中NDRG2与胰岛素分布情况一致。提示NDRG2在胰岛细胞中发挥着重要的生物学功能。②在四种胰岛细胞系中,在蛋白及mRNA水平均检测到NDRG2的表达,其中在INS-1及MIN6细胞中表达相对较高。推测表达量的高低可能与细胞本身有关。③在胰岛细胞系INS-1,MIN6中,下调NDRG2后发现,NDRG2与胰岛素mRNA的表达存在负相关。推测NDRG2可能作为蛋白激酶Akt的底物参与胰岛素信号通路。④在MIN6细胞中,下调NDRG2没有影响PDX-1的表达与分布。提示NDRG2与胰岛素之间的相关性可能不通过PDX-1调控。
其他文献
本课题的研究目标是对流感病毒血凝素转位结构域(HA2)进行截短和突变,筛选获得长度最短、转位功能较强的HA2优化短肽,用于靶向促凋亡分子的构建。在本课题组前期的工作中,已将HA2
一、前言 CF-900系列FFT分析仪是日本小野测器(株)在CF-500和CF-300基础上研制成的小型综合性的FFT分析系统。目前已经可以提供的产品有双通FFT分析仪CF-910和小型FFT分析系
红花草在我县种植时间长,面积大,单产也较高。但是,由于用法不当,肥效来得慢,使早稻迟发,遇上阴雨低温的年份,还容易导致赤枯病的发生。因此,早稻产量往往不高。 为了充分发
人们可以想到:如果能自动并连续地测定溶液浓度,将为溶液处理工程的生产管理、工厂废液等的测量、分析仪表的检测提供有力的手段。例如,在电镀行业中,因为难以连续测量溶液
日前,由国家科学技术委员会正式立项的国家“863”高科技研究发展项目——“消防机器人”研究课题,在公安部上海消防科学研究所通过专家组验收。这一历时三年之久的研制项目
目的:   探讨近视眼儿童的角膜前表面形态系数与角膜前表面高阶像差的相关关系。   方法:   横断面研究。随机选取我院门诊检查的近视儿童71例(125只眼),等效球镜-0.67
自1955年以来的20年间,从日本遗传育种的研究趋向来看,仍以稻麦材料作为研究中心。方法方面,在导入和发展群体遗传学、生统遗传学的基础上,出现了计量育种,此外抗病育种、利
我县地处浙西,衢江两岸分布着大片的黄土丘陵,据普查,全县有98万亩,其中可利用面积90.8万亩,目前已开地造田8.6万多亩,营造各种林木34.2万亩,可开垦面积尚有48万亩。县委计
(一)毛苕子的植物学特征及生态习性:毛苕子全名叫“毛叶苕子”或“毛野豌豆”。是一年生或越年生豆科植物。全株有茸毛,茎柔软、匍蔔,开花期茎长1.5—3米,茎基部有分枝。叶
摘要提高农村中学教学质量是当前研究的热点和难点。针对农村中学教学中存在的一些问题,本文从教育观念、办学条件、师生互动以及教学管理等方面进行了分析,并提出相应的解决措施。  中图分类号:G63文献标识码:A    中学教学是提高农村人口素质的重要环节,在农村教育中的作用至关重要。农村中学教学为我国农村经济的发展提供智力基础,是农村经济社会建设中的重点工作。但是,由于受到社会条件、经济政策因素和农村人