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目的:探究超级化环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization activated cyclic nucleotide gated channels,HCN)对肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)大鼠肠道运动功能的作用;为IBS发病机制提供实验依据。方法:(1)IBS模型大鼠:SD大鼠在出生第8–14天,每天固定时间给予60 mmHg压力结直肠扩张刺激1 min,对照组除了不行结直肠刺激外,其他过程与IBS组一样。待第8周,通过痛阈和腹外斜肌放电幅值来评估SD大鼠是否出现内脏痛觉敏化;(2)通过离体肠道组织灌流,比较对照组与IBS组结肠运动的频率、张力之间的差异;(3)采用Western bolt方法检测HCN1和HCN2在大鼠结肠的表达情况;(4)冰冻切片后,通过免疫荧光双标检测HCN1和HCN2与Cajal间质细胞标志物c-kit在大鼠结肠上的定位关系;(5)通过肠道组织全层铺片,免疫荧光双标检测HCN1和HCN2与Cajal间质细胞标志物c-kit在大鼠结肠平滑肌肌间神经丛上的定位关系;(6)离体肠道组织分别给予HCN2阻断剂(尼氟酸,Niflumic acid,NFA)和HCN通道阻断剂(ZD7288),观察其对肠道运动频率、张力的影响。结果:(1)IBS大鼠成年后,其痛阈较对照组降低;在40 mmHg~60 mmHg结直肠扩张压力下,IBS大鼠腹外斜肌放电幅值增高,痛反应加强(p<0.01)。(2)在离体肠道组织灌流实验中,IBS组大鼠离体肠道运动的频率及张力均高于对照组(p<0.05)。(3)Western blot显示HCN1和HCN2在IBS大鼠结肠的表达高于对照组(p<0.05)。(4)免疫荧光双标显示HCN1和HCN2与Cajal间质细胞标志物c-kit在大鼠结肠上的肌间神经丛存在共定位关系,且IBS组的平均荧光强度值显著高于对照组(p<0.01)。(5)肠道组织全层铺片后,通过免疫荧光双标检测HCN1和HCN2与Cajal间质细胞标志物c-kit在大鼠结肠平滑肌肌间神经丛上存在共定位关系。(6)在离体肠道组织灌流中:(1)30μmol/L NFA和100μmol/L NFA均使IBS大鼠肠道运动频率减慢、运动幅度降低,与对照组之间有显著差异(p<0.05);10μmol/L NFA对IBS大鼠肠道运动的频率及幅度无明显作用,两组之间的差异没有统计学意义(p>0.05);但10μmol/L NFA使对照组大鼠肠道运动的频率增加,两组之间的差异有统计学意义(p<0.05);10μmol/L NFA对照组大鼠肠道运动幅度无明显作用,两组之间的差异没有统计学意义(p>0.05)。(2)50μmol/L ZD7288使IBS大鼠肠道运动频率减慢、幅度降低,给药前后之间的差异有统计学意义(p<0.05);再给予30μmol/L NFA对大鼠肠道运动频率、幅度无明显作用(p>0.05)。50μmol/L ZD7288对对照组大鼠肠道运动频率、幅度无明显作用,给药前后之间的差异没有统计学意义(p>0.05);再给予30μmol/L NFA对大鼠肠道运动频率、幅度无明显作用(p>0.05)。ZD7288对NFA的阻断作用,说明了IBS大鼠肠道运动功能是通过HCN通道起作用的。结论:结肠HCN1和HCN2的表达上调,提高了Cajal间质细胞的兴奋性,可能导致了肠易激综合征大鼠肠道动力异常。